Comprehensive utilization of innovative virus indicators for microbial water safety

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近年，不活化ウイルスと無傷ウイルスを識別するために，キャプシド完全性（RT-）qPCRが開発された。本研究では，SD-CDDP-（RT-）qPCRを用いて，上水および水道水中の無傷ウイルスの検出を検討した。関東地方で採取した63の水試料（表流水，n＝20，水道水，n＝43）についてウイルスを検出した．表流水では，従来の(RT-)qPCR法では，PMMoV（100%）が他のヒト病原性ウイルス（30%‐60%）よりも高い頻度で検出された．SD-CDDP-(RT-)qPCRでも，intact PMMoV（95％）が他のウイルス（20～45％）よりも多く検出された．水道水では，従来の（RT-）qPCRではPMMoV（9%）とAiV（5%）を除き，ほとんどの対象ウイルスが不検出であった．地下水中の水道水にはPMMoVが存在しないのにAiVが存在することは、地下水中のウイルス指標としてのPMMoVの限界を示すものであると思われる。表流水から作られる水道水のウイルス安全性を保証するために、無傷のPMMoVが存在しないことを利用できる可能性がある。また、マウス肝炎ウイルスに対して、CDDPは100uMの濃度で、RT-qPCRによる感染性の選択的検出（CDDP-RT-qPCR）に最も有効な試薬として同定された。CDDP-RT-qPCR法とRT-qPCR法を用いて，首都圏で採取した16検体の生排水からSARS-CoV-2を検出し，比較検討した．RT-qPCRのみで評価した場合，5検体がSARS-CoV-2陽性であった。しかし，CDDP-RT-qPCRでは3検体からしか検出されなかった．CDDP-RT-qPCRは廃水中のSARS-CoV-2の感染性を決定することはできなかったが，この方法はRT-qPCRによって得られたSARS-CoV-2の陽性結果の解釈を改善することができる．