アルキンタギングによる脳の病態生理学解明の新たなツールの開発と応用

使用炔标记阐明脑病理生理学的新工具的开发和应用

• 批准号: 20H02881
• 负责人: 塗谷 睦生
• 金额: $ 11.32万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H02881/
• 关键词: アルキンタグ; 脳; プローブ; 生理活性物質

本研究では、脳内化学情報伝達様式の解析のため、蛍光標識ができない低分子量生理活性物質をアルキン基により標識して可視化解析することを試みている。研究3年目の本年度は、昨年度までに開発に成功したペプチド性生理活性物質のアルキンタギング法を用い、オキシトシンの脳内動態の解析を試みた。オキシトシンは古くから知られていた末梢組織における生理機能調節に加え、近年、脳内で働き、母子、或いは社会一般における社会的結びつきという高次の精神機能の発現に重要な役割を果たすことが知られるようになった。しかし、分子量が1000程度と非常に小さいため、蛍光標識などができず、よって脳内で放出された後の作用部位や動態などに関して多くが謎に包まれたままであった。そこで、本研究のアルキンタギング法により、オキシトシンの脳内動態の解析を試みた。まず、生化学研究で多用される第一級アミノ基修飾試薬を用い、オキシトシンに分子量比１：１でアルキンを付加することに成功し、アルキンタグ・オキシトシンの開発に成功した。これを脳組織に反応させ、固定後クリック反応により蛍光色素で検出すると、脳組織に特徴的な結合を示すことが明らかになった。更にこれは内在性のオキシトシンにより競合阻害されたことから、アルキンタグ・オキシトシンは、オキシトシンの生物学的性質を模した模倣プローブとなることが明らかになった。そしてその結合様式の解析により、細胞外に放出されたオキシトシンは、細胞内に取り込まれることは無く、細胞表面の結合部位に結合し、その後比較的早く乖離する、一時的な反応を示すことが分かった。更に、免疫組織染色との融合解析により、海馬における特徴的な結合は、これまで知られていなかった一部の標的細胞に特異的なことも分かり、オキシトシンの脳内での作用に新たな知見がもたらされた。これらの結果を取りまとめ、論文で報告した。

The purpose of this study is to analyze the chemical information of low molecular weight physiologically active substances (LMW), low molecular weight physiologically active substances (LMWs), low molecular weight physiologically active substances (LMWBs), low molecular weight physiologically active substances (LMWBs), low molecular weight physiologically active substances (LMWBs), low molecular weight physiologically active substances (LMWBs), bioactive substances (LMWs), bioactive substances (LMWs), The purpose of the study is to successfully analyze the sexual physiological activities in this year and last year through the use of the method of dynamic analysis in this year and last year. In recent years, in general, mother and son, or in general, the results of the society have been improved. High-order mental machines have been able to realize the importance of health care. The molecular weight of 1000 is very small, light-labeled, light-emitted, and the active parts are dynamic after the release of the molecular weight. In this study, we need to know how to analyze the state of affairs in this study. The molecular weight and molecular weight of the first-stage chemical basis for the study of chemistry and biochemistry are higher than those at 1:1. The molecular weight is higher than that at the end of the day. The combination of light pigments, light pigments and tissue characteristics. It's important to know that there is something wrong with the nature of biology. The combination method is used to analyze the DNA, the extracellular DNA is released from the cell, the intracellular DNA is isolated from the cell, the bonding site of the cell surface is isolated from the cell, the temperature is earlier than that of the cell, and the one-time response shows the differentiation of the cell. Immuno-tissue staining was used to analyze the immune tissue fusion assay, the combination of the specific antibody of the sea fish, the fusion of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immuno-tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining, the fusion analysis of the immune tissue staining. The results show that you need to read your report and report.

项目成果

Application of non-linear Raman scattering microscopy to pharmacology to visualize invisible targets

非线性拉曼散射显微镜在药理学中的应用以可视化不可见目标

• DOI: 10.1254/fpj.22060
• 发表时间: 2022
• 期刊: Folia Pharmacologica Japonica
• 作者: 田中彬寛;中野智美;國枝武和;塗谷睦生
• 通讯作者: 塗谷睦生

微視的薬物動態の解析手段としての非線形光学顕微鏡

非线性光学显微镜作为分析微观药代动力学的工具

• 发表时间: 2022
• 作者: 李知英;酢谷明人;金子凛;笹野哲郎;井原雄介;幸田尚;竹内純;古川哲史;石野史敏;塗谷睦生
• 通讯作者: 塗谷睦生

非線形光学顕微鏡の脳科学研究への応用

非线性光学显微镜在脑科学研究中的应用

• 发表时间: 2023
• 期刊: フォトニクスニュース
• 作者: 住拓磨;山本英明;守谷哲;竹室汰貴;金野智浩;佐藤茂雄;平野愛弓;塗谷睦生
• 通讯作者: 塗谷睦生

非線形光学顕微鏡 ~SHG 顕微鏡~

非线性光学显微镜~SHG显微镜~

• 发表时间: 2020
• 作者: Nii Takuro;Maeda Yuichi;Motooka Daisuke;Naito Mariko;Matsumoto Yuki;Ogawa Takao;Oguro-Igashira Eri;Kishikawa Toshihiro;Yamashita Makoto;Koizumi Satoshi;Kurakawa Takashi;Okumura Ryu;Kayama Hisako;Murakami Mari;Sakaguchi Taiki;Das Bhabatosh;Nakamura Shota;O;塗谷睦生
• 通讯作者: 塗谷睦生

脳組織内オキシトシンの動態解析を実現する新規プローブの開発と応用

脑组织催产素动态分析新探针的研制及应用

• 发表时间: 2021
• 作者: 中村花穂;塗谷睦生
• 通讯作者: 塗谷睦生