Study of molecular mechanisms for translation termination and ribosome recycling by eukaryotic ribosome

真核核糖体翻译终止和核糖体回收的分子机制研究

• 批准号: 20H03180
• 负责人: 伊藤 耕一
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03180/
• 关键词: リボソーム; tRNA分子擬態タンパク質; タンパク質合成; 翻訳終結; tRNA擬態タンパク質; 品質管理; 分子遺伝学; キーワード; リボソーム再生

本年度、分子遺伝学手法の特性などを考慮し計４年間で実施する研究の第二年度として、計画【1】の分子遺伝学的解析のパイロット実験から更に進んだ候補因子た機能ドメインの特定に成功し公表した。また、計画【2】の実践投入の予備的実験を踏まえた実験計画を継続して行なった。【１】翻訳終結状態を識別する分子機構の分子遺伝学解析。分子遺伝学的手法（forward/reverse genetics法）で、tRNA擬態蛋白質が関わる翻訳終結機構・蛋白質合成品質管理機構をモニターするアッセイ株を用い、新規因子およびその機能部位探索を実施した。得られた因子の既知因子（ASC1, S20等）の分子表面上にHel2相互作用ドメイン特定し分枝機能モデルを提唱した（論文公表済）。新規な因子の変異体がクラスターする領域として新たな機能ドメインを特定した。【２】 mRNA上の翻訳終結のための因子群の動態を可視化する新規手法開発本研究計画では、正常・異常翻訳終結にかかわる因子群にRNA編集酵素を融合した因子を細胞内に導入することで、mRNA遺伝暗号読み枠上のどのような領域（配列コンテキストや、5’CAP-mRNA-polyA tail構造上の相対位置）でリボソームにアクセスするかを細胞全体のトランスクリプトーム上にマップすることができる。本年度は、昨年度につづき必要な遺伝子コンストラクト、発現系を用いた予備実験を行っている。リボソーム再生因子ABCE1について、多角的な変異体を用いた解析の結果、翻訳終結-リボソーム再生-翻訳開始の各ステップの関連性の解析を進めている。

This year, we have conducted a study on the characteristics of molecular biology in the past four years. In the second year of this year, we have conducted a study on the characteristics of molecular biology in the second year of the study of molecular biology in the second year of this year. The plan [2] has been put into the equipment in the first place. [1] to analyze the molecular structure and molecular biology of the molecular structure. Molecular pharmacology techniques (forward/reverse genetics method), tRNA status protein analysis, protein synthesis, protein synthesis, product management, plant usage, and new regulation factors explore the location of the machine. The known factors (ASC1, S20, etc.) are known. The Hel2 interaction on the surface of the molecule is related to the specific branch mechanism. The new specification factor has a significant impact on the field, and the new mechanism is capable of providing information on specific applications. [2] the dynamics of the factor group on the mRNA can be changed into the field of this research project, the normal research program, the RNA collection of enzymes, the fusion of factors, the intracellular penetration of the factor, the code of the mRNA, the field of the factor, the field of the new method, and the field of the research project. 5'CAP-mRNA-polyA tail is in the same position.) the whole body of the cell is in the same position. In this year's and last year's financial year, it is necessary to make sure that it is necessary to use the information system to make sure that it is necessary to pay attention to the equipment. The regeneration factor ABCE1 is affected, the polygonal body is analyzed by using the results of the test, and the results are analyzed by the software, and the results are analyzed by the analysis of the connectivity of each system.