プロスタグランジン受容体を標的とした構造に基づく創薬

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８種類存在するPG受容体のうち、現在もまだその半数が立体構造未決定である。特に、PGD2受容体DP1、PGF2α受容体FP、PGI2受容体IPの構造が未決定であり、これらの受容体がPGE2やトロンボキサンA2とのリガンド構造の微細な違いをどのようにして識別しているのかは未だ明らかではない。加えて、FP受容体アゴニストは緑内障の治療薬として、IP受容体アゴニストは閉塞性動脈硬化症の治療薬として治験が実施されており、また過去には、DP1受容体アンタゴニストがナルコレプシーの治療薬として、EP1受容体アンタゴニストが過活動膀胱や逆流性食道炎を対象として治験が行われた経緯があり、これらの受容体の正確な立体構造情報を得ることは、創薬を上も重要な課題である。一方、PG受容体を含むGPCRファミリーは一般に野生型では非常に不安定であり、発現・精製のためには変異導入による受容体安定化が必須となる。そこで本年度は、立体構造未決定のPG受容体に対して、N末端およびC末端の切断、細胞内第３ループへの水溶性タンパク質の融合、膜貫通領域への点変異導入を行い、熱安定性の改善を行った。さらに得られた熱安定性変異体を昆虫細胞等に発現させ、タグ精製およびゲルろ過精製を行い、十分量の精製タンパク質が得られることを確認した。さらに、立体構造情報を用いたin silicoドッキングスクリーニングについて予備的な検討として、既存のPG受容体リガンドとの結合を予測するための条件設定を行った。