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チョウザメ類の卵成熟誘起ステロイドの同定とその産生制御機構の解明

鲟鱼卵母细胞成熟诱导类固醇的鉴定及其产生控制机制的阐明

基本信息

批准号：
20J11357
负责人：
長谷川祐也
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J11357/
关键词：
卵成熟誘起ステロイド DHP チョウザメ卵成熟 LC/MS/MS GTH LHRH

项目摘要

アムールチョウザメhsd3b、cyp17a1、cyp17a2およびhsd17b12Lの完全長cDNA配列のクローニングおよび転写産物の酵素活性解析を行なった。アムールチョウザメにおいて、hsd3b、cyp17a1、cyp17a2およびhsd17b12Lの働きによりプレグネノロン（P5）から17α, 20β-ジヒドロキシ-4-プレグネン-3-オン（DHP）が合成されることを示した。アムールチョウザメにおけるDHP産生を担う酵素をコードする遺伝子は、チョウザメ類より上位に位置するサクラマスやナイルティラピアと共通していたことから、条鰭類を通してDHP産生を担うステロイド合成酵素をコードする遺伝子は一貫していることを示した。卵成熟前後の卵濾胞におけるアムールチョウザメhsd3b、cyp17a1、cyp17a2およびhsd17b12LのmRNA発現動態を調べた。成熟期に黄体形成ホルモン（LH）の刺激によりアムールチョウザメhsd3b mRNA量が急増し、その後、 cyp17a1 mRNA発現の抑制およびcyp17a2 mRNA発現の促進が生じることで、P5から17OHPが産生されることを示唆した。17OHPが産生された後、hsd17b12L mRNA発現がLH刺激により誘導されDHPが産生されるという制御機構を予測した。また、アムールチョウザメhsd17b12L mRNAのLH刺激による発現誘導はサクラマスと異なり強くなく、アムールチョウザメcyp17a1 mRNA発現にメダカでみられるような急激な抑制はみられなかったことから、3β-HSDによるP4の産生調節がアムールチョウザメのDHP産生に重要であることを示唆した。さらに、アムールチョウザメにおいて、cyp17a1 mRNA発現の抑制およびhsd17b12L mRNA発現の誘導が卵成熟および排卵の誘導に極めて重要であることを示した。

アムールチョウザメhsd3b、cyp17a1、cyp17a2およびhsd17b 12L's complete length cDNA array was prepared and the enzyme activity analysis of the product was carried out.アムールチョウザメにおいて、hsd3b、cyp17a1、cyp17a2およびhsd17b12Lの働きによりプレグネノロン（P5）から17α, 20β-ジヒドロキシ-4-プレグネン-3-オン（DHP）がsynthetic されることをshowした. DHP-produced enzyme enzyme伝子は、チョウザメ级より上的に Position するサクラマスやナイルティラピアと通していたことから, ray fin type を通してDHP produces を聆ステロイド Synthetic enzyme をコードする伝子は consistent していることを Show した. Before and after the egg matures, the mRNA expression of the egg filter cells, hsd3b, cyp17a1, cyp17a2, hsd17b12L, is dynamic. During the mature stage, the corpus luteum formation (LH) is stimulated, the amount of hsd3b mRNA increases rapidly, and the amount of cyp17a1 is stimulated. cyp17a2 suppresses the appearance of mRNA and promotes the expression of cyp17a2, and promotes the production of P5 17OHP. After the production of 17OHP, the hsd17b12L mRNA appeared and LH stimulation induced the production of DHP and the control mechanism was predicted.また、アムールチョウザメhsd17b12LのLH stimulation of mRNA induces はサクラマスとdifferent なりstrong くなく、アムールチョウザメcyp17a1 3β-HS It is important to regulate the production of DHP4 and adjust the production of DHP. hsd17b12L The expression of mRNA is very important in inducing egg maturation and ovulation.