標的細胞の細胞質に分子を輸送する多機能タンパク質カプセルの開発

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本研究では、Aquifex aeolicus lumazine synthase(AaLS)キャプシドというタンパク質カプセルをベースとして、これに遺伝子工学的エンジニアリングを施すことにより、METカスケードを人工的に活性化させるタンパク質カプセルの開発を目的としている。METカスケードの活性化は組織再生等の細胞活動を促すことが示唆されており、人工的なMETタンパク質の活性化は再生医療につながることが期待される。本研究においては、既知のMET結合大環状ペプチドを、AaLSキャプシドの外側に位置するループに導入することで、AaLSキャプシド表面に複数のペプチドを提示することに成功した。この際、METタンパク質によるプルダウンアッセイを行うことで、キャプシド表面に提示されたペプチドがMETタンパク質への結合能を有することを実証した。また、得られたキャプシドがMETの二量体化を促進するかを、METの二量体化によって引き起こされる自己リン酸化を計測することで確かめた。また、これらの系を元にキャプシド表面へのペプチドの提示量の最適化を行い、蛍光ラベルしたキャプシドを用いてエンドソーム内への集積も確かめた。