Mechanism underlying Spiroplasma-induced late male-killing in the small brown planthopper Laodelphax striatellus and determination of related genes.

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オス殺し抵抗性遺伝子を特定することを目的とし、供試サンプル（F0、F1およびF2個体）を得るためオス殺し系統のメス（オス殺しスピロプラズマ感染）とオス殺し抵抗性系統のオスの交配実験を行った。F1での性比は、先行研究の結果から予測された通り概ね１：１となったが、一方でF2個体のメス：オス：死亡個体の比率は予測された理論値である４：３：１とはならず、死亡個体がやや多い傾向が見られた。この結果から、ヒメトビウンカにおけるスピロプラズマのオス殺しに対する抵抗性は、単一の遺伝子座ではなくポリジーンによって支配される量的形質である可能性が示唆された。リュウキュウムラサキとオス殺しボルバキアに関する先行研究では、オス殺し抵抗性には遺伝子量補償に関わる単一の遺伝子が関係していることが示唆されている。ヒメトビウンカとスピロプラズマにおいては、抵抗性のメカニズム（＝オス殺しが起こるメカニズム）が全く異なっている可能性があり、非常に興味深い結果である。交配実験により得られたサンプルについて、イソプロパノール沈殿を利用したDNA抽出を行った。規定のDNA収量が得られたサンプルについて、受託によるGRAS-Di解析を行い、QTL解析のためのデータを得た。今後、得られたデータについて詳細に解析を行い、オス殺し抵抗性に関わる遺伝子の特定を試みる。またスピロプラズマの全ゲノムを解析することを目的として、虫体からのスピロプラズマ高分子量ゲノムDNAの回収を試みた。スピロプラズマ感染メスの磨砕、濾過、細菌細胞のペレット化を2000個体分行い、QIAGEN社Genomic-tipを使用して高分子量DNAの精製を行った。得られたDNAサンプルについて、PacBio Sequel IIeによるゲノム受託解析を行った。スピロプラズマ以外の細菌のコンタミネーションもあり、結果として完全な環状ゲノムは得られなかったが、今後スピロプラズマ由来のリードの選定など詳細な解析を行う。