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代謝における酵素集合体の液滴による再現と制御

使用液滴复制和控制代谢中的酶组装体

基本信息

批准号：
20J21734
负责人：
浦朋人
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J21734/
关键词：
液-液相分離酵素活性化酵素連続反応

项目摘要

本年度は、昨年度に引き続き、L-乳酸酸化酵素が液滴内で約1桁活性化する現象について詳細な調査を進めた。動的光散乱法および顕微鏡観察を組み合わせた調査により、塩濃度に応じて液滴のサイズが数十ナノメートルから数マイクロメートルまで変化することを発見した。この液滴のサイズの塩濃度依存性を利用して塩濃度を変化させながら酵素活性測定を行ったところ、液滴のサイズが小さいほど酵素活性化効果が高いことを明らかにした。以上の結果と、昨年度までに得られていた1) 液滴内での酵素の反応速度論パラメータの変化と2) 酵素の高次構造の変化の結果をまとめた論文が発表および口頭発表を行った。液滴は細胞内を区画化する集合体であり、様々な反応との関連が明らかにされている。これらの研究では、試験管内で目的のタンパク質を含む液滴を形成させ分析して得られた知見から細胞内の液滴の形成機構や機能に言及している。観察を容易にするために数十マイクロメートル程度の液滴を試験管内で作製する例も多いが、本来細胞内を区画化する液滴の挙動を理解するために、細胞と同程度かそれ以上の大きさの液滴を分析することに対して疑問もあがっている。本年度の成果は、液滴のサイズが酵素の活性を変化させることを示した点で意義がある。また液滴形成の前駆体として数百ナノメートルサイズの集合体の存在が他の研究でも報告されはじめており、今後はこのサイズの集合体の検出やダイナミクスの調査が細胞内の液滴の役割の理解において重要になるだろう。

In the current year and last year, there is about 1 truss activation in the droplets of L-lactic acid acidifying enzymes. The dynamic light dispersion method is used to monitor the data of the system, the temperature of the droplet, the temperature of the droplet, the temperature of the liquid drop, the temperature, the temperature and the temperature. The degree of dependence of the droplet on the activity of the enzyme was determined by the determination of the enzyme activity of the droplet. The results of the above results, which were obtained last year, show that the speed of the enzyme in the droplet is very high. 2) the results of the high-order fermentation of the enzyme show that the mouth table is full of data. The droplets will be painted in the intracellular area, and the collection will be divided into two parts. The purpose of this study is to analyze the formation of liquid droplets containing liquid droplets and to know the mechanism of the formation of intracellular liquid droplets. It is easy to measure the temperature of the liquid droplets in the trachea. In the same degree, the droplets of the trachea were painted in the intracellular area, and the droplets of the cells were used to understand the temperature. This year's results, droplets, enzyme activity, enzyme activity, enzyme activity and enzyme activity. In front of the droplets, there are hundreds of droplets in front of the droplets, and there are several hundred droplets in front of the droplets. there are several hundred droplets in front of the droplets.