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Identification and evaluation of novel vaccine candidates to control poultry red mites (Dermanyssus gallinae)

控制家禽红螨（鸡皮螨）的新型候选疫苗的鉴定和评价

基本信息

批准号：
20J22235
负责人：
藤澤宗太郎
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J22235/
关键词：
ワクモワクチン

项目摘要

本年度は当初の予定通り下記 (1) の研究を主に行い、加えて (2) の研究にも着手した。(1) 申請者らは過去に実施したワクモのトランスクリプトーム解析により3種類のワクチン抗原候補(cystatin様分子、Dg-Cys; 銅イオントランスポーター様分子、Dg-Ctr1; adipocyte plasma membrane-associated protein様分子、Dg-APMAP)を同定した。本年度は令和2年度に抗ワクモ効果を示したDg-Cys及びDg-Ctr1について、その成果を基に、抗ワクモワクチンの成分として特許申請を行った (特願2021-080691)。また、Dg-APMAPの免疫血漿についても同様に抗ワクモ効果を検討した結果、発育ステージを問わず殺ダニ効果を認めた。さらに、Dg-Cysの免疫血漿をDg-Ctr1またはDg-APMAPの免疫血漿と組み合わせた混合血漿を用いて抗ワクモ効果を検討したところ、成ダニに対しても殺ダニ効果を示し、また各血漿を単独で用いた場合と比べ殺ダニ効果が増強することを示した。(2) 組換えマレック病ウイルスを用いたウイルスベクターワクチンの検討を行った。病原性遺伝子を欠損させたマレック病ウイルスゲノムにDg-CysまたはDg-APMAP遺伝子を挿入した感染性クローンプラスミドを作製し、ニワトリ線維芽細胞に導入することで組換えウイルスを得た。感染細胞よりmRNAを抽出し、RT-PCRによってDg-Cys及びDg-APMAP遺伝子の発現を確認した。今後は感染細胞における標的タンパク質の発現を確認した後、組換えウイルスをニワトリに免疫し、抗体産生の誘導能の検討が必要である。

This year, we started our research on (1) and (2) respectively. (1)The applicant has changed from the previous implementation to the analysis of three types of antigen candidates (cystatin molecule, Dg-Cys; copper molecule, Dg-Ctr1; adipocyte plasma membrane-associated protein molecule, Dg-APMAP). This year and 2012, the Company has issued a license application for Dg-Cys and Dg-Ctr1. The license application for Dg-Cys and Dg-Ctr1 has been issued. Dg-APMAP's immune plasma test results and development test results Dg-Ctr1 and Dg-APMAP are used to detect and detect the effects of different types of plasma. (2)The search engine is set to work. Pathogenic DNA is not damaged by Dg-Cys and Dg-APMAP DNA is introduced into infectious DNA. mRNA was extracted from infected cells and the discovery of Dg-Cys and Dg-APMAP genes by RT-PCR was confirmed. In the future, it is necessary to investigate the induction of antibody production after the identification of the target protein in infected cells.