精子形成に必須である生殖細胞間架橋のダイナミックな可視化解析

点击翻译按钮获取中文摘要

精巣特異的な細胞間結合は精子形成において重要な存在であり、欠損させると雄性不妊になる。しかし、それらの機能や異なる細胞間結合同士の関連性は不明である。そこで、本研究では（1）精巣特異的細胞間結合の一因子であり、Ectoplasmic Specialization（ES）や生殖細胞間結合Intercellular Bridge（ICB）など複数の構造体に局在するKIAA1210のノックアウトマウス（KO）を作製し、表現型や遺伝子産物の発現・局在解析を行なった。計画していた以上の実験を実施することができ、精子形成におけるKIAA1210の機能に近づくことができた。現在、論文の投稿準備中である（2）また、更なる精巣特異的細胞間結合の知見を得るために、ICBサンプルあるいは抗KIAA1210抗体を用いた免疫沈降サンプルのプロておミクス解析により、複数の新奇遺伝子を選択し、抗体及びノックアウトマウスを作製した。選択した新奇遺伝子のうち6種類の遺伝子ノックアウトマウスが作製できたが、先に報告されてしまった遺伝子を除いた3種類（TSNAXIP1、CEP112、RIBC2）のノックアウトマウスの解析を進めた。TSNAXIP1は細胞間結合との関係は未明であるものの、欠損により精子頭部の形態に以上が見られた。現在論文審査中である。一方、RIBC2は欠損させても何も異常が見られなかったが、CEPP112についてはノックアウトマウスが不妊になり、精子の頭部と尾部の結合に異常が見られた。現在論文投稿準備中である。（3）生体内での細胞間結合の関連性を可視化解析するためのマウスについてはTEX14-Neongreenがようやく作製できた。他の遺伝子についても順次作製し、解析を進める予定である。