鰓上皮細胞通過時間によるウイルス性出血性敗血症ウイルスの病原性評価

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ウイルス性出血性敗血症(VHS)による被害が北半球の各地で大きな問題となっている。本疾病の病原体であるVHSウイルス（VHSV）はこれまでに50魚種以上から分離され、12の遺伝子型が報告されているが、異なる遺伝子型のVHSVが、どのような宿主特異性を示すのかについての詳細は知られていないため、新たな遺伝型が侵入した場合、どの魚種がどの程度被害を受けるのか予測がつかない。そこで本研究では各魚種由来の鰓上皮細胞におけるウイルス通過時間と感染試験による死亡率との関係を調べ、各遺伝子型VHSVの各魚種に対する病原性が対応する鰓上皮細胞の通過時間により評価できるかどうか調べた。先ずVHSウイルスが鰓上皮細胞を通過する時間を測定する実験系を導入した。次いで淡水魚としてアマゴ，海水魚としてマダイに対し遺伝子型12種類のVHSウイルスの病原性を感染試験により調べた。アマゴへの試験おいて,陽性対照魚種であるニジマスでは遺伝子Ia型で50%の累積死亡率を示したが，アマゴのIa型の累積死亡率は10%であった。そこで，ニジマスとアマゴの鰓上皮細胞におけるIa型 VHSウイルスの通過をウイルス接種０，２，６，24，48，72時間後で調べたところ，ニジマスでは48及び72時間後では検出用のEPC細胞で細胞変性効果が観察されたが，アマゴでは72時間後でもCPEは観察されず，アマゴの鰓上皮細胞はニジマスそれに比べIa型VHSウイルスの通過時間が遅いことが示唆された。つまりニジマスとアマゴでは毒性を示すウイルス型と鰓上皮細胞のウイルス通過時間との間に関連性のある可能性が推察された。なお，マダイではいずれの遺伝子型でも死亡は観察されなかった。さらに世界的にVHSウイルスの診断に用いられているIP5B11抗体のエピトープを他のラブドウイルスのフルゲノム解析と合成ペプチドのドットブロット法により明らかにした。