致病型大肠杆菌K12的酪氨酸磷酸化激酶(etK, E. coli Tyrosine Kinase)是属于第四类分泌复合体的一个膜蛋白，其胞内结构域具有酪氨酸磷酸化激酶的功能，并对细菌表多糖的合成、分泌和形成起着关键作用。研究结果表明etK蛋白具有两步磷酸化的机制：首先自我磷酸化底物结合区中的Tyr574,以此激活自身激酶活性；再通过互磷酸化另一个etK分子C-末端Tyr富集区中的Tyr，促进多糖分子的合成和分泌功能。但是，目前还没有获得该蛋白磷酸化后，即活化状态的三维结构，使得etK磷酸化激酶在自磷酸化、互磷酸化过程的动力学及分子机制还不甚明了。本项目为加深理解etK蛋白在磷酸转移过程中的动力学特性和分子机制，将应用质谱方法监测etK蛋白Tyr574位点和C-末端Tyr富集区随时间变化的磷酸化水平；同时，应用液体核磁共振方法研究与etK激酶功能密切相关的位点在磷酸转移过程中的动力学过程。