Novel cryodevices for vitrification of cumulus-oocyte complexes and pancreatic islets

用于卵丘-卵母细胞复合物和胰岛玻璃化冷冻的新型冷冻装置

• 批准号: 20K06364
• 负责人: 保地 眞一
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K06364/
• 关键词: 膵島移植; ガラス化保存; シルクフィブロインスポンジ; ラット; シルクフィブロイン; VEGF; 脱細胞化組織; スフェロイド培養; 偽膵島; ガラス化デバイス; 卵丘卵子複合体; 膵ランゲルハンス島

本研究では、冷却前後の諸操作を簡便化できる新規デバイスをシルクなどの生体適合性の高い材料から作製・加工し、ウシ卵丘卵子複合体やラット膵島のような多種多様な機能をもつ細胞群から構成される細胞塊のガラス化保存に適用することを目的としている。これまでに、加工性・吸水性に優れた多孔質のシルクフィブロインスポンジディスク上において大量かつ一括でガラス化保存したラット膵島が正常な形態を保って回収できること、体外でグルコースに応答して正常にインスリンを分泌する能力を維持していること、ストレプトゾトシン投与によって誘発した１型糖尿病モデルラットへの腎被膜下膵島移植によって同ラットの血糖値を正常化させられることを明らかにした (Islets 2020; Transplant Proc 2021)。ウシ卵丘卵子複合体に対しては多層シルクフィブロインシートが高吸水性ガラス化素材になるという報告 (Theriogenology 2020) も合わせ、細胞塊を対象にした新規ガラス化デバイスの開発という当初の目的はすでに達成できている。本年度、酵素消化による膵島単離過程やガラス化工程で損傷を受ける膵島周囲の微小環境の修復を目指した研究 (Cryobiology 2021)、ならびに膵島をトリプシン処理して単一細胞懸濁液にしてからスフェロイド培養して偽膵島として再構築する研究 (J Tissue Eng Regen Med 2021) をさらに展開するため、ガラス化保存技術との相性について検討した。いずれもナイロンメッシュシートをガラス化デバイスにした実験結果だが、高静水圧処理により調製した脱細胞化肝臓パウダーはガラス化・加温ラット膵島のインスリン分泌機能を亢進できること、ガラス化・加温ラット膵島由来の偽膵島はグルカゴン分泌α細胞とインスリン分泌β細胞が正しく再配置されることがわかった。

In this study, the operation before and after cooling was conducted to facilitate the use of new regulations. After cooling, the biocompatibility of high-grade materials was processed, and the cumulus-egg complex was processed. Many kinds of multi-functional cell populations were developed into cell populations, and the purpose of chemical preservation was used for the purpose of chemical preservation. Processing water absorbent

项目成果

Profiling of differentially expressed proteins between fresh and frozen-thawed Duroc boar semen using ProteinChip CM10.

• DOI: 10.5187/jast.2023.e27
• 发表时间: 2023-03
• 期刊: Journal of animal science and technology
• 影响因子: 2.3
• 作者: Kim YM;Park SW;Lee MJ;Jeon DY;Sa SJ;Jeong YD;Seong HS;Choi JW;Hochi S;Cho ES;Chung HJ
• 通讯作者: Chung HJ

シルクフィブロインディスクをデバイスとしてSSV法によってガラス化保存したラット膵島の腎被膜下移植

以丝素蛋白盘为装置移植肾囊下大鼠胰岛并采用SSV法玻璃化保存

• 发表时间: 2020
• 作者: 中山(岩月) 研祐;山中 貴寛;根岸 淳;手島 淳輝;玉田 靖;平林 真澄 & 保地 眞一
• 通讯作者: 平林 真澄 & 保地 眞一

Characterization of homozygous Foxn1 mutations induced in rat embryos by different delivery forms of Cas9 nuclease

• DOI: 10.1007/s11033-022-08054-0
• 发表时间: 2022-11
• 期刊: Molecular Biology Reports
• 影响因子: 2.8
• 作者: Teppei Goto;Kyoko Yogo;S. Hochi;M. Hirabayashi

ガラス化・加温ウシ成熟未受精卵へICSIしたときの胚盤胞発生率はIVFの場合と異なり新鮮対照に劣らない

与 IVF 不同，对玻璃化和加热的成熟牛未受精卵进行 ICSI 时，囊胚发育率并不逊色于新鲜对照。

• 发表时间: 2022
• 作者: 井出 美涼;上野 清;平林 真澄 & 保地 眞一
• 通讯作者: 平林 真澄 & 保地 眞一

Fabrication of functional rat pseudo‐islets after cryopreservation of pancreatic islets or dispersed islet cells

• DOI: 10.1002/term.3219
• 发表时间: 2021-05
• 期刊: Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine
• 影响因子: 3.3
• 作者: Kenyu Iwatsuki;M. Hirabayashi;S. Hochi