シュードタイプによるBウイルス抗体検出の新規アプローチ

一种通过假型检测 B 病毒抗体的新方法

• 批准号: 20K06404
• 负责人: 福士 秀悦
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K06404/
• 关键词: ヘルペスBウイルス; VSVシュードタイプ; 抗体検出; Bウイルス; ヘルペスB

本研究ではBウイルスの外套糖タンパク質を被った水疱性口炎ウイルス(VSV)シュードタイプ　（BV/VSVシュードタイプ）を新規に作製し、ウイルスそのものを用いずにBウイルス感染を検出する系を開発する。これを用いてヒトにおけるBウイルスに対する抗体を特異的に検出可能とすることを目的とする。また、外套糖タンパク質モノクローナル抗体を作製し、競合ELISAによりBウイルス特異的抗体検出法の構築を試みる。令和２-３年度までの研究でBウイルスの外套糖タンパク質を被ったBV/VSVシュードタイプは作出できなかった。Hilterbrand ら(mBio, 2021)によると、ヘルペスウイルス(HSV-1)の外套糖タンパク質を被ったHSV-1/VSVシュードタイプは特殊な細胞(受容体Nectin-1をstableに発現させたマウスメラノーマ細胞)にしか感染せず、感染過程もHSV-1そのものとは大きく異なる。このため、HSV-1に近縁のBウイルスの場合も、感染性の解析にはVSVシュードタイプは適さない可能性が示されていた。しかし、令和４年度の研究で、外套糖タンパク質発現哺乳細胞発現ベクターを至適化することによって、Vero細胞等へ感染性のあるBV/VSVシュードタイプの作出が可能となった。これを用いたBウイルス中和試験を検討中である。一方、本研究計画では、外套糖タンパク質に対するモノクローナル抗体を用いた競合ELISAの開発を研究計画に取り入れている。これまで、外套糖タンパク質の一つ、gDに対するモノクローナル抗体を得ており、反応特異性を検証する予定である。

本研究ではBウイルスの外套糖タンパク質を被った水疱性口炎ウイルス(VSV)シュードタイプ　（BV/V SV (SV)のを用いずにBウイルス infected を検出する线を开発する. It is possible to use the specific に検 of the いてヒトにおけるBウイルスに対する antibody to achieve the とすることをpurpose.また, coated sugar タンパクquality モノクローナル antibody を production し, competitive ELISA によりB ウイルス specific antibody 検出法のconstruct をtest みる. Reiwa 2-3 までの research でBウイルスの coat sugar タンパクquality を was made by ったBV/VSV シュードタイプは できなかった. Hilterbrand ら(mBio, 2021) HSV-1/VSV special cell (HSV-1/VSV special cell) The body Nectin-1 is stable and the cells are infected and the infection process is HSV-1.このため, HSV-1にNearly縁のBウイルスのoccasionも, Infectious analysisにはVSVシュードタイプはsuitableさないpossibilityが Showされていた.しかし、Reiwa 4th year research で、Coat sugar タンパク性発appears mammary cells 発appears ベクターをto adaptability することIt is possible to produce infectious BV/VSV using VSV and Vero cells.これを Use いたBウイルスneutralization test験を検to discuss the neutralization である. On the one hand, the research project of this research project is to use the ELISA-based research project to use the coated sugar-containing polypeptide antibody. The test results are as follows: