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コウモリ由来SARSーLIKEコロナウイルスの感染性に関する研究

蝙蝠来源的SARS样冠状病毒的感染性研究

基本信息

批准号：
20580336
负责人：
福士秀悦
金额：
$ 2万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20580336/
关键词：
SARS-CoV コロナウイルス SL-CoV レセプターコウモリ

项目摘要

本研究の目的は、コウモリから検出された、SARSコロナウイルス(SARS-CoV)に近縁のSARS-LIKEコロナウイルス(SL-CoV)の感染性を解析し、どのような動物種にSL-CoVが感染可能なのか明らかにすることである。平成20年度は、SL-CoVの感染性を解析するためのツールを得るため、SL-CoV Sを被ったVSVシュードタイプを作製した。まず、SL-CoVのS遺伝子cDNAを哺乳動物細胞発現用ベクターにクローニングした。このプラスミドを293T細胞にトランスフェクションし、ウェスタンブロットによりSL-CoV Sタンパク質の発現を確認した。次にSL-CoV Sを発現させた293T細胞にVSV-Gを被ったVSVシュードタイプを種ウイルスとして感染させ、培養上清からSL-CoV Sを被ったVSVシュードタイプ(VSV-SL-S)を回収した。SL-CoV Sのさまざまな変異欠失体を持つシュードタイプも同様の手法で作製した。これらのVSVシュードタイプをVero E6、コウモリ由来BKT1、およびACE2を発現するBHK細胞に接種したところ。いずれの細胞にも感染しなかった。これらの結果からSL-CoVはSARS-CoVとは異なり、ACE2をレセプターとして使用しないと考えられた。また、Vero E6,コウモリ由来BKT1にはSL-CoVのレセプターは発現していないと考えられた。今後、さらに多くの培養細胞を用いてVSV-SL-Sの感染性を解析することにより、コウモリに常在していたSL-CoVがどのような中間宿主をへて、どのようなメカニズムでヒトに伝播するSARS-CoVになったのか解明する手がかりになる。

The purpose of this study was to analyze the infectivity of SARS-like virus (SL-CoV) in SARS patients, and to clarify the possibility of SL-CoV infection in different animal species. In 2010, SL-CoV infection was analyzed and controlled. The cDNA of SL-CoV gene is used in mammalian cell development. The occurrence of SL-CoV S quality was confirmed by the 293T cell. SL-CoV S was discovered in 293T cells and VSV-G was detected in culture supernatant. SL-CoV S was detected in culture supernatant. SL-CoV has been developed for the purpose of controlling the variation of the body. These VSV cells were inoculated with BHK cells developed from BKT1, ACE2 and Vero E6. The cells are infected. The result is that SL-CoV is different from SARS-CoV and ACE2 is different from SARS-CoV. Vero E6, In the future, many cultured cells will be used to analyze the infectivity of VSV-SL-S. In the future, many cultured cells will be used to analyze the infectivity of SARS-CoV.