Regulatory mechanisms of seminal proteins on uterine function and its application to improvement of fertility in cows

牛の低受胎（リピートブリーディング）の原因の1つとされる子宮での上皮成長因子（Epidermal growth factor, EGF）の濃度異常を解消し、受胎性を回復させる効果を持つと考えられる精漿タンパク質の1つがオステオポンチンである。今年度は、このオステオポンチンを遺伝子組換えタンパク質として調製してEGF濃度の低下がみられるリピートブリーダー牛への投与を行い、その効果を検証した。また、オステオポンチンを豊富に含む生乳からもオステオポンチンを調製し、同様に効果を検証した。組換えタンパク質は、大腸菌をベクターとして調製し、牛のオステオポンチンcDNAの塩基配列をもとに大腸菌ベクターに合わせたコドンの最適化を行った。予備的検討の結果からオステオポンチンの投与量は1 mgとし、発情日の人工授精実施後に腟深部に投与した。乳中オステオポンチンはイオン交換クロマトグラフィーにより調製し、組換えタンパク質と同様に1 mgを腟内に投与した。その結果、いずれのオステオポンチンも50%から60％のリピートブリーダー牛で子宮でのEGF濃度異常を解消した。治療後のEGF濃度正常化率には両群間で差異はみられなかったが、治療処置3日後の子宮内膜EGF濃度は組換えタンパク質を投与した群で高かった。遺伝子組換えオステオポンチンを投与した牛では、多くがEGF濃度の正常範囲の高い領域を示したのに対し、乳中オステオポンチンを投与した群では、EGF濃度は異常値（低値）から連続して正常範囲内の全域に広く分布する傾向がみられた。両オステオポンチンによる治療効果には、ホルモン製剤によるEGF濃度異常牛の治療でみられる農家あるいは牛群間での差異はみられず、全ての牛群でほぼ同等の効果がみられた。

牛の低受胎（リピートブリーディング）の原因の1つとされる子宮での上皮成長因子（Epidermal growth factor, EGF）の濃度異常を解消し、受胎性を回復させる効果を持つと考えられる精漿タンパク質の1つがオステオポンチンである。今年度は、このオステオポンチンを遺伝子組換えタンパク質として調製してEGF濃度の低下がみられるリピートブリーダー牛への投与を行い、その効果を検証した。また、オステオポンチンを豊富に含む生乳からもオステオポンチンを調製し、同様に効果を検証した。組換えタンパク質は、大腸菌をベクターとして調製し、牛のオステオポンチンcDNAの塩基配列をもとに大腸菌ベクターに合わせたコドンの最適化を行った。予備的検討の結果からオステオポンチンの投与量は1 mgとし、発情日の人工授精実施後に腟深部に投与した。乳中オステオポンチンはイオン交換クロマトグラフィーにより調製し、組換えタンパク質と同様に1 mgを腟内に投与した。その結果、いずれのオステオポンチンも50%から60％のリピートブリーダー牛で子宮でのEGF濃度異常を解消した。治療後のEGF濃度正常化率には両群間で差異はみられなかったが、治療処置3日後の子宮内膜EGF濃度は組換えタンパク質を投与した群で高かった。遺伝子組換えオステオポンチンを投与した牛では、多くがEGF濃度の正常範囲の高い領域を示したのに対し、乳中オステオポンチンを投与した群では、EGF濃度は異常値（低値）から連続して正常範囲内の全域に広く分布する傾向がみられた。両オステオポンチンによる治療効果には、ホルモン製剤によるEGF濃度異常牛の治療でみられる農家あるいは牛群間での差異はみられず、全ての牛群でほぼ同等の効果がみられた。