Elucidation of the molecular pathogenesis of sarcopenia and development of novel therapeutic strategies

阐明肌肉减少症的分子发病机制并开发新的治疗策略

基本信息

批准号：
19H03556
负责人：
頼建光
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Dokkyo Medical University (2022)Tokyo Medical and Dental University (2019-2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1. Protein kinase A（PKA）活性と白色脂肪におけるエネルギー代謝についてPKA活性は cAMP と A kinase anchoring proteins（AKAPs）で制御される。先行研究でAKAPs-PKA 結合阻害薬が腎臓で PKAを活性化し抗利尿作用を発揮すると報告したが，腎臓で効果に乏しい化合物X がマウス白色脂肪で PKA を活性化した。白色脂肪は通常エネルギー貯蔵の場として働くが，ベージュ化することによりエネルギー消費を亢進する。化合物 X は短期投与によりマウス白色脂肪でベージュ化の指標である UCP-1発現を誘導し，長期投与によって高脂肪食負荷マウスで血中の遊離脂肪酸を低下させて体重増加を抑制した。PKA 活性化がエネルギー代謝への介入の有用な標的となり，化合物 X が慢性腎臓病（CKD）におけるエネルギー代謝異常の治療薬となる可能性を示した。2.不飽和脂肪酸（PUFA）の関与についてCKDのエネルギー代謝における PUFA 代謝酵素と代謝物の役割につき、CKD モデルマウスを作成し，CKD におけるそれらの役割を検証した。C57BL／6 J マウスに対して 5／6 腎摘による CKD モデルを作成し，CKD 腎における PUFA 代謝酵素の増減を qPCR で解析した。CKD において発現量が変化した代謝酵素に関してはその遺伝子改変マウスを用いて CKD モデルを作成し，フェノタイプを解析した。CKD の腎臓において主要な PUFA 代謝酵素のうち Alox15 がコントロール群と比して変化しており，mRNA・蛋白レベル共に増加していた。Alox15 KO マウスの CKD モデルを作成すると，野生型と比して血清 Cre の低下及び腎線維化の抑制を認めた。Alox15がCKDに置けるエネルギー代謝障害に関与している可能性が示唆された。

1。白脂肪PKA活性中的蛋白激酶A（PKA）活性和能量代谢受CAMP和激酶锚定蛋白（AKAP）调节。先前的研究报告说，Akaps-PKA结合抑制剂激活肾脏中的PKA并发挥抗利尿特性，但在肾脏中有效的化合物X会激活小鼠白脂肪中的PKA。白脂肪通常充当储能的地方，但米色可以增加能量消耗。化合物X是通过短期服用UCP-1的诱导的，UCP-1是小鼠白脂肪中米色的指标，长期给药降低了高脂肪饮食的小鼠血液中的游离脂肪酸，从而抑制了体重增加。 PKA激活表明，它是干预能量代谢的有用靶标，表明化合物X可以成为慢性肾脏病（CKD）的能量代谢异常的治疗剂。 2。不饱和脂肪酸（PUFA）涉及PUFA代谢酶和代谢产物在CKD的能量代谢中的作用，我们创建了CKD模型小鼠并测试了它们在CKD中的作用。通过5/6肾切除术为C57BL/6 J小鼠制备CKD模型，并通过qPCR分析了CKD肾脏中PUFA代谢酶的增加或减少。对于在CKD中更改表达水平的代谢酶，使用转基因小鼠创建了CKD模型，并分析了表型。在CKD中主要的PUFA代谢酶中，与对照组相比，ALOX15改变了，mRNA和蛋白质水平都增加了。当制备ALOX15 KO小鼠的CKD模型时，与野生型相比，观察到血清CRE的降低并抑制肾纤维化。已经提出，ALOX15可能参与可以放置在CKD中的能量代谢疾病。