食道扁平上皮癌における慢性炎症シグナルを標的とした新規治療法の開発

(1) ヒト食道扁平上皮癌におけるIL-6ファミリーサイトカインの発現についてヒト食道扁平上皮癌細胞株のRNAを抽出し、定量的RT-PCRを用いてIL-6ファミリーサイトカインの発現を検討した。IL-6ファミリーサイトカインの中でもIL-6、LIFの発現が認められることが同定された。またヒト食道扁平上皮癌培養上清を用いてELISAを行ったところIL-6、LIFが検出された。IL-6、LIFによるオートクラインのメカニズムでヒト食道扁平上皮癌が進展することを想定した。(2) ヒト食道扁平上皮癌におけるIL-6、LIFのノックダウンの効果siRNAを用いてヒト食道扁平上皮癌にIL-6やLIFのノックダウンを導入し、細胞株の表現型の変化やシグナル発現の変化について検討を行った。LIFのノックダウンにより、YAPやその標的遺伝子の発現が抑制されることを同定した。IL-6やLIFのノックダウンを行うことで、Cyclin D1やMki67といった増殖関連遺伝子の発現が抑制され、MTT assayによりヒト食道扁平上皮癌の増殖抑制効果が確認された。LIFのノックダウンにより抗アポトーシス関連遺伝子の発現が抑制され、食道扁平上皮癌細胞株のアポトーシスが誘導された。LIFノックダウンによりヒト食道扁平上皮癌細胞株の浸潤能・遊走能が抑制されることを確認した。一方で、IL-6やLIFに対する中和抗体は抗腫瘍効果を示さなかった。また食堂扁平上皮癌細胞株においてLIFをノックダウンすることでYAPの核移行が抑制された。

(1) ヒト食道扁平上皮癌におけるIL-6ファミリーサイトカインの発現についてヒト食道扁平上皮癌細胞株のRNAを抽出し、定量的RT-PCRを用いてIL-6ファミリーサイトカインの発現を検討した。IL-6ファミリーサイトカインの中でもIL-6、LIFの発現が認められることが同定された。またヒト食道扁平上皮癌培養上清を用いてELISAを行ったところIL-6、LIFが検出された。IL-6、LIFによるオートクラインのメカニズムでヒト食道扁平上皮癌が進展することを想定した。(2) ヒト食道扁平上皮癌におけるIL-6、LIFのノックダウンの効果siRNAを用いてヒト食道扁平上皮癌にIL-6やLIFのノックダウンを導入し、細胞株の表現型の変化やシグナル発現の変化について検討を行った。LIFのノックダウンにより、YAPやその標的遺伝子の発現が抑制されることを同定した。IL-6やLIFのノックダウンを行うことで、Cyclin D1やMki67といった増殖関連遺伝子の発現が抑制され、MTT assayによりヒト食道扁平上皮癌の増殖抑制効果が確認された。LIFのノックダウンにより抗アポトーシス関連遺伝子の発現が抑制され、食道扁平上皮癌細胞株のアポトーシスが誘導された。LIFノックダウンによりヒト食道扁平上皮癌細胞株の浸潤能・遊走能が抑制されることを確認した。一方で、IL-6やLIFに対する中和抗体は抗腫瘍効果を示さなかった。また食堂扁平上皮癌細胞株においてLIFをノックダウンすることでYAPの核移行が抑制された。