"Low-Volume" (LV)-Amplifikation und -Sequenzierung von DNA aus einzelnen Mitochondrien

单个线粒体 DNA 的低容量 (LV) 扩增和测序

• 批准号: 33115471
• 负责人: Professorin Dr. Sabine Lutz-Bonengel
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Rechtsmedizin
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2010-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/33115471?language=en
• 关键词: Low; Volume; LV; Amplifikation; und

Untersuchungsmaterial mit weniger als 100 pg Template-DNA kommt in der forensischen Spurenkunde regelmäßig vor. Eine Typisierung solcher low-copy-number (LCN)-Proben gelingt bei Anwendung herkömmlicher Analysetechniken oft nur unvollständig oder gar nicht. Ziel ist es daher, neue Techniken zu entwickeln, die auch bei geringster Spurenmenge zuverlässige Ergebnisse erwarten lassen, ohne dass sich die Gefahr einer Kontamination oder Fehltypisierung erhöht. Die Anwendung von chemisch strukturierten Chips erlaubt eine low-volume (LV)- Amplifikation mit ausreichend hoher Sensitivität sogar für Einzelzellanalysen. In Verbindung mit der Durchflusszytometrie bietet sich die Möglichkeit zur optisch kontrollierten Ablage von Einzelzellen und Einzelmitochondrien. Das Verfahren eignet sich daher nicht nur für die Analyse von LCN-Spuren, sondern auch zur Klärung von grundlegenden Fragen der forensischen Genetik, z.B. hinsichtlich der Entstehung von mitochondrialer Heteroplasmie oder der Weitergabe mitochondrialer DNA-Populationen im maternalen Stammbaum.

使用100 pg模板DNA的材料可以在法医现场进行检测。一种低拷贝数（LCN）的类型化方法--在分析技术上可能经常被忽略或忽略。Ziel is daher，neue Techniken zu entwickeln，die auch bei geringster Spurenmenge zuverläsouth Ergebnisse erwarten lassen，ohne dass sich die Gefahr einer Kontamination or der Fehltypisierung erhht. Die Anwendung von chemisch strukturierten Chips erlaubt eine low-volume（LV）- Amplifikation mit ausreichend hoher Sensitivität sogar für Einzelzellanalysen. In Verbindung mit der Durchflusszytometrie bietet sich die Möglichkeit zur optisch kontrollierten potassium von Einzelzellen und Einzelboutin. LCN-Spuren的分析方法不仅限于此，还包括遗传学方法的基本步骤，z.B.本文主要介绍了在Stammbaum中对染色体异质性或染色体DNA群体的研究。