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PIWIタンパク質リン酸化によるターゲットRNA結合制御機構の解明

通过PIWI蛋白磷酸化阐明靶RNA结合控制机制

基本信息

批准号：
19J12479
负责人：
榊原和洋
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J12479/
关键词：
piRNA ピンポンサイクル Ago3

项目摘要

令和元年度の研究において、私はpiRNAの生合成機構の一端を解明することに成功した。piRNAとは生殖組織特異的に遺伝子発現制御を行う小分子RNAであり、その機能不全はトランスポゾンの脱抑制を引き起こし個体を不妊にいたらしめる。つまり、piRNAは生殖組織のゲノム安定性に必須な分子と言える。私はそのpiRNAが二次的に増幅されるピンポンサイクルという経路に着目した。特にピンポンサイクルにおいてAgo3というPIWIタンパク質によって作られるpiRNAについての未解明なことが多かったためAgo3に注目して研究を行った。私が解明したことは主に以下二点である。一つ目はAgo3がRNA切断断片を連続的かつ規則的に産生することでpiRNA中間体を生成していることである。RNAi法を用いたSiwiという遺伝子の発現抑制を行い、ピンポンサイクルを人為的に停止させることでRNA断片切断状態のAgo3を単離し、そのRNAを抽出した。そしてそのRNAをシーケンス解析することによりAgo3が連続的に効率よくpiRNAの元となるpiRNA中間体を賛成していることを示したのである。二つ目はAgo3結合タンパク質であるVretがAgo3依存的piRNA生合成の足場となることである。Ago3は核周辺に存在する顆粒体Nuageに局在することで正常なpiRNA生合成機能を発揮できることを明らかとした。そして、その局在にVretというタンパク質が必須でありAgo3をNuageに引き留めていることが解明されたのである。

Ling and Yuan's annual research program, private piRNA production and synthesis institutions have explained that they have been successful. The piRNA reproductive tissue is responsible for the control of small RNA molecules and the ability of the machine to induce pregnancy in individuals. The stability of reproductive tissue must be controlled by molecular markers in the reproductive tissue of piRNA. In the middle of the piRNA, you can see if you want to look at the road. In particular, you need to know that you are not aware of the problem that you are not aware of the problem that you are not clear. You are not aware of the fact that you are not aware of the problem. You have to pay attention to the fact that you are not aware of the problem. You need to pay attention to the study of Ago3. This is the best way to do research. I would like to make a private explanation of the following two points. One of the key rules of the Ago3 RNA cut-off fragment link is that the body in the piRNA generates an error message. The RNAi method uses the Siwi filter to detect the suppression of the operation, the detection of the artificial device, the cut-off of the RNA fragment, the isolation of the Ago3, and the extraction of the RNA. The rate of the RNA link is different from the piRNA element of the piRNA link. The body size in the piRNA shows that the data is different from each other. The purpose of this paper is to combine the Ago3 with the synthesis of piRNA which is dependent on the Ago3 of the piRNA. In the Ago3 nuclear periphery, there is a gene somal Nuage in the normal piRNA biosynthesis mechanism. It is necessary to check the Ago3 Nuage in the Vret system to understand how to solve the problem.