Analyse axonaler Wegfindungsmechanismen diencephaler dopaminerger Neurone im Zebrafisch Danio rerio

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Die zellulären und molekularen Mechanismen, die der Wegfindung dopaminerger Axone unterliegen, sind weitgehend unbekannt. Aus biomedizinischer Sicht aber ist dieses Wissen eine wichtige Vorraussetzung für eine erfolgreiche Behandlung der Parkinson¿schen Krankheit mittels Zelltransplantation oder regenerativer Ansätze. Der gezielte Einsatz von Wegfindungsmolekülen könnte eine geeignete Umgebung für das Auswachsen von Axonen aus diesen Transplantaten erzeugen und somit das Entstehen funktionaler Verknüpfungen verbessern. In diesem Projekt sollen die axonalen Projektionen diencephaler dopaminerger Neurone im sich entwickelnden Zebrafisch charakterisiert und ihre Wegfindungsmechanismen untersucht werden. Mittels anti-Tyrosine Hydroxylase (TH) Immunfluoreszenz und transgener Fische, die GFP unter der Kontrolle des th Promoters exprimieren (th:rasGFP), sollen die axonalen Projektionen analysiert und im Detail beschrieben werden. Durch konfokal-mikroskopische Analyse von fluoreszenten doppel Whole Mount In situ Hybridisierungen für th und Rezeptoren der bekannten Wegfindungsmoleküle im Zebrafisch sollen potentiell am Projektionsverhalten beteiligte Signale identifiziert werden. Diese Moleküle sollen dann in ihrer Funktion mittels gain- und loss-of-function Experimenten analysiert werden. Bereits charakterisierte Mutanten, die Wegfindungsfehler der retino-tektalen Projektion zeigen, sollen ebenfalls im Hinblick auf das Auswachsen dopaminerger Neurone untersucht werden. Zur Identifizierung neuer Moleküle, die an der axonalen Wegfindung diencephaler dopaminerger Neurone beteiligt sind, soll ein Mutagenese-Screen in den th:rasGFP transgenen Fischen durchgeführt werden. Ziel der Arbeit ist das Erstellen einer Karte der Wegfindungssignale für die verschiedenen dopaminergen Projektionsbahnen des Zebrafisches.