NTCP吸着後のB型肝炎ウイルス細胞進入機構の解析

NTCP吸附后乙型肝炎病毒进入细胞机制分析

• 批准号: 19J21455
• 负责人: 佐宗 若奈
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J21455/
• 关键词: B型肝炎ウイルス; HBV; NTCP; 細胞侵入; Gタンパク質共役受容体; entry; EGFR; GPCR

これまでの研究により見出されたG蛋白質共役受容体(GPR)はsodium taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP)の細胞内局在を制御しており、B型肝炎ウイルス (HBV)はこの制御機構を利用して細胞進入している可能性が示唆された。GPRのノックダウンは、NTCPを介したHBVの細胞吸着を低下させたため、細胞膜上のNTCP発現量を検出すると、GPRのノックダウンによって細胞膜上のNTCP発現が低下していた。このときNTCPの細胞内局在を免疫蛍光法によって観察すると、通常は細胞膜上に集積するNTCPが、GPRノックダウン細胞では細胞内に顆粒状になって局在していた。NTCPの分解を阻害するbafilomycin A1を処理すると、通常 細胞膜上に局在するNTCPがGPRノックダウンにより細胞内へ局在変化する様子がより顕著に観察された。一方、GPRを過剰発現させた細胞では、細胞表面のNTCP発現が増加し、HBV感染も1.5倍に増加した。これら結果より、GPRはNTCPの局在を制御することで細胞のHBV感染感受性を制御することが示唆された。これまでGPRの生理活性リガンドがGPRに結合すると下流シグナルを活性化することが示されている。GPR生理活性リガンドを細胞に処理すると、HBV感染の増加が認められた。このときNTCP依存的に結合するpreS1-probeの細胞吸着が増加していた。つまりNTCPの局在は、GPRの下流シグナルの活性により制御される可能性が考えられた。これら研究成果を足がかりとし、今後さらにウイルスの細胞進入制御メカニズムの解析が進めば、ウイルスの増殖様式や感染感受性決定機序の理解だけでなく、宿主因子の新しい生理機能の解明や、新規の抗ウイルス戦略の開発にも繋がると期待される。

These studies have shown that GPR (G protein co-receptor) is responsible for the intracellular regulation of sodium taurocholate co-transporter polypeptide (NTCP), and HBV (hepatitis B virus) is responsible for the regulation of cellular entry. The expression of NTCP on the cell membrane of HBV decreased due to the presence of GPR and NTCP. The intracellular structure of NTCP is observed by immunoluminescence, and usually accumulated on the cell membrane. The intracellular structure of NTCP is granular. The breakdown of NTCP is inhibited by bafilomycin A1, which is usually observed in the cell membrane. The number of HBV infections increased by 1.5 times. The results showed that the NTCP system could inhibit HBV infection. The physiological activity of GPR is expressed in the following ways: The physiological activity of GPR was detected by cell processing, and the increase of HBV infection was recognized. This NTCP dependent binding increases the uptake of preS1-probes into cells. The possibility of controlling the activity of NTCP in the downstream of GPR is examined. The results of this research are sufficient to further the analysis of cell entry control mechanisms in the future, the understanding of cell proliferation patterns and infection susceptibility determination mechanisms, the understanding of new physiological functions of host factors, and the development of new anti-cell strategies.

项目成果

MAX BioPharma(米国)

MAX BioPharma（美国）

Should a viral genome stay in the host cell or leave? A quantitative dynamics study of how hepatitis C virus deals with this dilemma

• DOI: 10.1371/journal.pbio.3000562
• 发表时间: 2020-07-01
• 期刊: PLOS BIOLOGY
• 影响因子: 9.8
• 作者: Iwanami, Shoya;Kitagawa, Kosaku;Watashi, Koichi
• 通讯作者: Watashi, Koichi

Universiteit Utrecht(オランダ)

乌得勒支大学（荷兰）

B型肝炎ウイルス侵入を制御するGタンパク質受容体の同定と作用機序解析

控制乙型肝炎病毒侵入的G蛋白受体的鉴定及机制分析

• 发表时间: 2019
• 作者: Saso W;Iwamoto M;Muramatsu M;Matano T;Watashi K
• 通讯作者: Watashi K

INTS(フランス)

INTS（法国）