权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Dynamics of RNA-protein complex in homologous chromosome pairing

同源染色体配对中RNA-蛋白质复合物的动力学

基本信息

批准号：
19K06503
负责人：
丁大橋
金额：
$ 2.75万
依托单位：
National Institute of Information and Communications Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

相同染色体の対合は親世代から承け継いだ相同染色体が互いを見つけて接着する過程で、正常な対合が相同組換えに不可欠である。相同染色体の相互認識と対合の分子機構を解明するのが本研究課題の究極な目的である。これまでの研究で、染色体上に滞留するlncRNAが相同染色体の相互認識の鍵であることが示唆された。lncRNAを染色体に引き留めるには、Smpタンパク質と呼ばれる複数な転写終結因子が必要である。lncRNAとSmpタンパク質が液液相分離によってドロップレットを形成する。異種類のlncRNAを持つドロップレットが互いに融合できず、同種類のlncRNAを持つドロップレットのみ互いに融合し結果として染色体の対合を促進することから、RNAが対合の特異性を決めることが示唆された。RNA配列とタンパク質の種類によって、どのようにドロップレットの性質が変わるかを解析するために、試験管内にドロップレットを再構成することを試みた。その結果、Smpタンパク質のうち、Seb1タンパク質単独でも相分離し、試験管内にドロップレットを形成できることが分かった。Seb1タンパク質にRNAを10ｎM程度加えると、Seb1ドロップレットの形成が大きく促進されて、しかもRNAがドロップレットに濃縮される。Seb1-RNAドロップレットをFARP (光褪色後蛍光回復法)で解析すると、異なるRNA種類を含むドロップレットが異なるFRAPプロファイルを示すことから、RNAの種類によってドロップレットの物理化学性質を決定されることが分かった。さらに、同じRNAを含むドロップレット同士がお互い融合しやすい傾向を示すことから、相同染色体相互認識のメカニズムが転写されるRNAとSeb1などSmpタンパク質から作られる染色体上のドロップレットが大きいな役割を果たすことがほぼ確実になった。現在発表論文を執筆中。

The same chromosome pairing is not allowed to occur in the same generation. Understanding the molecular mechanism of homologous chromosomes is the ultimate goal of this study. This study is aimed at identifying the key to mutual recognition of the same chromosome by lncRNA on chromosomes. lncRNA is a complex termination factor. lncRNA and Smp are the main components of liquid phase separation. IncRNAs of different species are fused to each other, while those of the same species are fused to each other. As a result, chromosome alignment is promoted, and the specificity of RNA alignment is determined. RNA alignment and quality of the species, the nature of the species, the analysis of the species, and the reconstruction of the species in the tube. The results of the test are as follows: 1. The quality of the test tube is separated from the quality of the test tube. Seb1 RNA was concentrated at 10nM to promote the formation of Seb1 RNA. Seb1-RNA is analyzed by FRAP (Fading Recovery after Photobleaching), and the RNA species are determined by FRAP. In addition, the same RNA contains the same chromosome, and the same chromosome has the same tendency to fuse with each other. In addition, the same chromosome has the same tendency to recognize each other. Now I am writing my thesis.