The regulation mechanisms of B. pertussis fimbriae gene expression

百日咳杆菌菌毛基因表达的调控机制

• 批准号: 19K07572
• 负责人: 大塚 菜緒
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K07572/
• 关键词: Bordetella pertussis; fimbriae; RisA; gene expression; mechanism

百日咳菌の線毛遺伝子fim3は複雑な発現制御機構下に置かれている。fim3遺伝子の上流(Pfim3領域)には特徴的なpolyC配列が存在するが、我々はこれまでにPfim3 polyC ≧14Cの場合はfim3遺伝子がvag (virulence-associated gene)、≦13Cの場合はvrg (virulence-repressed gene)として機能することを明らかにした。さらにfim3がvrgとして機能するにはリプレッサーBvgRおよびアクチベーターRisAの制御を受けることが示唆された。本研究は、fim3発現におけるRisAの制御機構を明らかにすることを目的とする。まず、組換えRisAタンパク質の精製方法を検討した。当初は組換えRisAの可溶化のため尿素含有の条件で精製していたが、尿素の存在によりRisAが本来とは異なる構造をとっている可能性が指摘された。そこで、可溶化剤不含有条件でのタンパク質精製を行なった。次に、得られた組換えRisAを用いた結合解析により、RisAが特異的にPfim3 poly-13Cに結合することを明らかにした。ただし、これまでの遺伝子発現解析により、RisAがアクチベーターとして機能する際にリン酸化およびc-di-GMPの関与が示唆されており、これら因子の存在によりRisAのPfim3-DNAへの結合が促進されることが予想された。そのため、次にRisAのリン酸化および検出条件の検討を行った。20 mMアセチルリン酸リチウムカリウム（リン酸基供与体）でRisAを処理すると、Phos-tag SDS-PAGEによりリン酸化されたRisA（RisA~P）が検出された。一方、RisA変異体ではリン酸化によるバンドのシフトアップは認められなかった。c-di-GMPはRisAのリン酸化に影響を与えなかったことから、c-di-GMPはRisA-PがPfim3へ結合する際に関与するものと考察された。

The fim3 of pertussis bacilli was copied, and the engine was installed under the control machine. There is a special polyC configuration in the upper stream of fim3 (Pfim3 domain). There is a link between Pfim3 polyC (14C), fim3 (virulence-associated gene), and 13C (virulence-repressed gene), which can be used to verify the performance of the device. The fim3 vrg equipment is capable of instigating and instigating the control of the RisA by using the BvgR equipment. In this study, fim3 shows that the control organization of the RisA system is responsible for the purpose of the test. This is the best way to improve the quality of the method. You need to know how to use RisA. At the beginning of the system, RisA soluble urea contained conditional RisA, and urea had a significant effect on the possibility of production of urea. There are no conditions in it, such as solubility, solubility, solubility and solubility. In the second half of the year, the RisA system was used to analyze the information and the Pfim3 poly-13C of the special RisA system. The analysis of the information, the RisA information, the analysis, the After RisA, the acidizing conditions are out of order. 20 mM, RisA, acid, acid, RisA (RisA~P), acid, RisA (RisA~P). One side, RisA, acid, acid and acid. C-di-GMP, RisA, acidizing, acidification, c-di-GMP, RisA-P, Pfim3, RisA-P, acid, acid

项目成果

Seroplevalence of anti-Bordetella pertussis IgA and IgM in Japanese healthy people.

日本健康人群中抗百日咳博德特氏菌 IgA 和 IgM 的血清阳性率。

• 发表时间: 2019
• 作者: Rei Fumimoto;Nao Otsuka;Hajime Kamiya;Tomimasa Sunagawa;Keiko Tanaka-Taya;Kazunari Kamachi;Keigo Shibayama.
• 通讯作者: Keigo Shibayama.

Molecular prevalence of Fim3-highly producible sequence in Bordetella pertussis

百日咳博德特氏菌中 Fim3 高产序列的分子流行率

• 发表时间: 2020
• 作者: 大塚菜緒;文元礼;蒲地一成;柴山恵吾
• 通讯作者: 柴山恵吾

Seroprevalence of IgA and IgM antibodies to Bordetella pertussis in healthy Japanese donors: Assessment for the serological diagnosis of pertussis

• DOI: 10.1371/journal.pone.0219255
• 发表时间: 2019-07-01
• 期刊: PLOS ONE
• 影响因子: 3.7
• 作者: Fumimoto, Rei;Otsuka, Nao;Shibayama, Keigo
• 通讯作者: Shibayama, Keigo

A novel multilocus variable-number tandem repeat analysis for Bordetella parapertussis

副百日咳博德特氏菌的新型多位点可变数量串联重复分析

• DOI: 10.1099/jmm.0.001095
• 发表时间: 2019
• 期刊: Journal of Medical Microbiology
• 影响因子: 3
• 作者: Kamachi Kazunari;Otsuka Nao;Fumimoto Rei;Ozawa Kensuke;Yao Shu-Man;Chiang Chuen-Sheue;Luu Laurence Don Wai;Lan Ruiting;Shibayama Keigo;Watanabe Mineo
• 通讯作者: Watanabe Mineo

The First Reported Case of Bordetella pertussis Bacteremia in a Patient With Human Immunodeficiency Virus Infection.

• DOI: 10.1093/ofid/ofac020
• 发表时间: 2022-03
• 期刊: Open forum infectious diseases
• 影响因子: 4.2
• 作者: Wakimoto Y;Otsuka N;Yanagawa Y;Koide K;Kamachi K;Shibayama K;Teruya K;Kikuchi Y;Oka S
• 通讯作者: Oka S