改良コンディショナルリプログラミングによる2型肺胞上皮細胞の新規培養法と機能解析

通过改进的条件重编程对2型肺泡上皮细胞进行新的培养方法和功能分析

• 批准号: 19K08630
• 负责人: 久田 修
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K08630/
• 关键词: 特発性肺線維症; 2型肺胞上皮細胞; 気管支肺胞洗浄; 肺胞マクロファージ; 幹細胞

2型肺胞上皮細胞は、特発性肺線維症をはじめとする慢性呼吸器疾患において中心的役割を持つ。しかし、患者肺から生細胞を得る事が難しい事、長期培養が難しい事から解析が十分には進んでいない。本課題はこの技術的制約を克服し、難治性肺疾患研究の基盤を構築する事が目的である。今までの研究で、マウス肺から2型肺胞上皮細胞を分離し、コンディショナルリプログラミング法により長期培養するためのプロトコールを確立した。さらに、肺癌手術の非癌部からヒト2型肺胞上皮細胞を分離培養し、将来の研究に備えて凍結保存するためのシステムを構築した。2型肺胞上皮細胞の研究には、患者肺からの細胞の入手が難しい事が障壁となっている。前年度にひきつづき、患者から入手が比較的容易な気管支肺胞洗浄液を用いて、2型肺胞上皮細胞の分離培養を試みた。気管支肺胞洗浄液の残余検体から、MACS法により2型肺胞上皮細胞を分離し、コンディショナルリプログラミング法により長期培養する方法を確立した。分離を試みた多くの患者検体で、2型肺胞上皮細胞の培養が可能であった。この方法を用いれば、侵襲の少ない気管支肺胞洗浄を用いて、患者の２型肺胞上皮細胞の入手が可能となる。ヒト2型肺胞上皮細胞を用いたオルガノイド作成は、安定したプロトコールを確立する事ができなかった。近年、オルガノイド技術が急速に進歩してきており、来年度も同様にオルガノイド作成の技術的検討を継続し、今までに保存した患者細胞の機能解析を行う。

Type 2 pneumocyte epithelial cells, idiopathic pulmonary fibrosis, chronic respiratory disease, and chronic respiratory disease are all in the center of the disease. It is difficult to obtain the patient's lung cells, and the long-term culture is difficult to analyze. This project aims at overcoming technical constraints and establishing the foundation for research on refractory lung diseases. Isolation of type 2 pneumocyte epithelial cells from Masato lungs The ルリプログラミング法により long-term cultivation するためのプロトコールをestablishedした.さらに, non-cancerous part of lung cancer surgery, からヒト2 pneumocyte epithelial cells を isolation and culture, のpreparation for future research, frozen preservation するためのシステムを construction した. The research on type 2 pneumocyte epithelial cells and the research on patient lung cells are difficult and difficult. In the previous year, it was easy to obtain a patient's lung cell washing solution and use it to isolate and culture type 2 pneumocyte epithelial cells. Isolation of type 2 pneumocyte epithelial cells by the MACS method and the residual body of the bronchial necrosis cell wash solution The long-term cultivation method of コンディショナルリプログラミング method has been established. It is possible to isolate and culture type 2 pneumocyte epithelial cells from patients' bodies. The method is to wash the lung cells with a small amount of invasion, and to use the method to clean the lung cells of the patient's type 2 lung epithelial cells. The type 2 pneumocyte epithelial cells are made with いたオルガノイド, and the stable したプロトコールをestablished する事ができなかった. In recent years, the technology of オルガノイド has been rapidly improved, and in the coming year it will be the same technology. The 検涙続し of the イド production technology and the functional analysis of the patient's cells are preserved now.

项目成果

Reversal of emphysema by restoration of pulmonary endothelial cells.

• DOI: 10.1084/jem.20200938
• 发表时间: 2021-08-02
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Hisata S;Racanelli AC;Kermani P;Schreiner R;Houghton S;Palikuqi B;Kunar B;Zhou A;McConn K;Capili A;Redmond D;Nolan DJ;Ginsberg M;Ding BS;Martinez FJ;Scandura JM;Cloonan SM;Rafii S;Choi AMK
• 通讯作者: Choi AMK

Characteristics of 68 patients with clinically proven sarcoidosis based on the Japan Society of Sarcoidosis and Other Granulomatous Disorders 2015 criteria.

根据日本结节病和其他肉芽肿性疾病协会 2015 年标准，68 名经临床证明患有结节病的患者的特征。

• DOI: 10.1016/j.resinv.2019.11.003
• 发表时间: 2020
• 期刊: Respiratory investigation
• 影响因子: 3.1
• 作者: Yamanouchi,Yoshitaka;Sawahata,Michiru;Sakamoto,Noritaka;Hisata,Shu;Shijubo,Noriharu;Konno,Satoshi;Yamaguchi,Tetsuo;Watanabe,Meri;Kawashima,Hidetoshi;Suzuki,Takuji;Bando,Masashi;Hagiwara,Koichi
• 通讯作者: Hagiwara,Koichi

Long-Term Follow-Up of a Patient with GM-CSF Antibody-Negative Pulmonary Alveolar Proteinosis Following Exposure to Dust after The Great East Japan Earthquake

东日本大地震后接触灰尘后 GM-CSF 抗体阴性肺泡蛋白沉积症患者的长期随访

• 发表时间: 2019
• 作者: Shu Hisata;Takuji Suzuki;Hiroyoshi Yamauchi;Shinya Ohkouchi;Masashi Bando;Koichi Hagiwara
• 通讯作者: Koichi Hagiwara

Safety and Tolerability of Combination Therapy with Nintedanib and Pirfenidone for Idiopathic Pulmonary Fibrosis: A Multicenter, Retrospective, Observational Study in Japan

• DOI: 10.1183/13993003.congress-2020.1847
• 发表时间: 2020-09
• 期刊: Idiopathic interstitial pneumonias
• 作者: S. Hisata;M. Bando;S. Homma;K. Kataoka;T. Ogura;S. Izumi;S. Sakamoto;Yoshinobu Saito;Kizuku Watanabe;Y. Shimizu;Motoyasu Kato;N. Inase

【呼吸器症候群(第3版)-その他の呼吸器疾患を含めて-】びまん性肺疾患 まれなびまん性肺疾患 肺胞微石症

[呼吸综合征（第3版）-包括其他呼吸系统疾病-]弥漫性肺病、罕见弥漫性肺病、肺泡微石症

• 发表时间: 2021
• 期刊: 日本臨床
• 作者: 久田修;萩原弘一
• 通讯作者: 萩原弘一