培養脂腺細胞の分泌膜小胞セボゾームの生成と周辺細胞への脂質供給機構
培养的皮脂细胞中皮脂分泌膜囊泡的生成及其对周围细胞的脂质供应机制
基本信息
- 批准号:19K08751
- 负责人:
- 金额:$ 2.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2019
- 资助国家:日本
- 起止时间:2019-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
脂腺細胞は、スクアレンなどの脂質を合成し、皮脂として皮膚表面に分泌する。我々は、ラットの脂腺細胞を培養したところ、脂質顆粒を含む膜小胞を活発に生成・分泌することを発見して、同膜小胞を「セボゾーム」と命名した(Endocrinology 2005年)。これまでにセボゾームはリサイクリングおよび、早期-後期エンドソーム、リソソーム、脂質ラフトなどを含有する新型の複合膜系であること、セボゾームはスクアレンやヒストンを濃縮しており、保湿機能に加え、抗菌活性を持つことが示唆された。セボゾームの分泌形式を解析するため、今回、セボゾーム分泌中の脂腺細胞の透過型電子顕微鏡による解析を試みた。【方法】初代培養の脂腺細胞はEGF添加D'MEMで培養維持した。セボゾーム分泌中の脂腺細胞をカバーガラスに播種し、数日培養しセボゾーム生成を確認後、冷グルタールアルデヒド2.5%緩衝液で固定した。定法通り処理を進め、透過型電子顕微鏡で観察した。【結果】試料作製の過程で樹脂包埋作業時にカバーガラスから細胞が剥がれず多くの試料が損傷し、良い条件で観察できる試料の作製が困難であった。かろうじて観察できた部分も試料作製時の固定、包埋などによる損傷があり、これまでに得ていた生細胞での蛍光染色観察結果との乖離が見られ、アーチファクトの影響が考えられた。【結論】透過型電子顕微鏡のための良好な試料作製が困難であったため、セボゾーム分泌中の培養脂腺細胞の十分な観察は今回はできなかった。脂腺細胞は他の一般的な培養細胞よりも脂質合成・蓄積能に富み、セボゾームは細胞外に突出した膜構造であるため、固定や包埋などの操作による損傷を受けやすく、試料作製を困難にした可能性がある。セボゾーム観察に適した試料作製条件の更なる検討が必要と考えられた。
Lipids are synthesized and secreted by lipid gland cells on the surface of the skin. In this paper, we describe the development and secretion of lipid granules in lipid gland cells (Endocrinology, 2005). This is a new type of composite membrane system that contains the following components: early and late components, soft components, lipid components, concentrated components, increased moisture retention, and antibacterial activity. Analysis of the secretory form of the lipid gland by transmission electron microscopy [Methods] Primary culture of adipocytes was maintained in the presence of EGF and D'MEM. The secretion of lipid gland cells was confirmed by seeding, culturing for several days, and then freezing in 2.5% buffer. Fixed method of processing, transmission type electronic micro-mirror detection [Results] During the preparation process of the sample, there was a lot of damage to the sample during the resin embedding operation, and it was difficult to prepare the sample under good conditions. The results of light staining and observation on the fixation, embedding and damage of some samples during preparation were examined. [Conclusion] It is very difficult to make a good sample by transmission electron microscopy, and it is very difficult to observe the secretion of cultured lipid gland cells. Fat gland cells are generally cultured cells, which are rich in lipid synthesis and accumulation, and which are difficult to prepare due to the possibility of damage caused by extracellular membrane structure, fixation, embedding, and manipulation. The test results show that the test preparation conditions are suitable for the test.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
脂腺細胞の分泌膜小胞、セボゾームの構成分子とエクソソームとの比較
皮脂细胞的分泌膜囊泡、皮脂体的构成分子和外泌体的比较
- DOI:
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:永井 彩子;澄田 道博
- 通讯作者:澄田 道博
細胞内物質輸送における、脂腺細胞の分泌膜小胞、セボゾームの役割
皮脂腺(皮脂细胞的分泌膜囊泡)在细胞内物质运输中的作用
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:永井 彩子;澄田 道博
- 通讯作者:澄田 道博
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- 作者:
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坪井良治
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- 资助金额:
$ 2.83万 - 项目类别:
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