眼感染症・迅速病因診断法の開発－核酸精製不要・ポータブル型多項目遺伝子検査－

开发眼部感染快速病原学诊断方法 - 无需核酸纯化的便携式多项目基因检测 -

• 批准号: 19K09953
• 负责人: 中野 聡子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Oita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K09953/
• 关键词: Direct Strip PCR; 検体直接PCR; 感染性ぶどう膜炎; 眼内炎; 角結膜炎; 臨床現場即時検査(POCT); 薬事申請; 医師主導臨床性能試験; 眼感染症; ぶどう膜炎

感染性ぶどう膜炎、眼内炎、角結膜炎は失明に至りQOLに生涯影響する重要疾患である。原因はウイルス、細菌、原虫、寄生虫と多岐にわたり、それぞれ治療法が異なる。臨床所見のみでは鑑別困難で、病因診断は遺伝子検査が有用であるが、眼科検体は微量(最少20μL)で従来検査(300μL以上)では検体量が不足した。さらに従来検査は繁雑で普及困難であった。眼感染症に対応する簡便・迅速な遺伝子検査試薬キットは国内外でも開発されておらず、病因診断に基づかない盲目的治療による不可逆な視力障害、副作用に苦しむ症例が多いことが課題で、正確・迅速・簡便な病因診断への眼科医療現場の積年の強いニーズがある。2013年に「難治性の眼感染疾患に対する迅速診断（PCR法）」が先進医療となった。しかし、保険診療化には迅速簡便で普及性の高いキット試薬開発が必要とされた。まず、我々は、核酸精製不要・検体直接PCR技術、マルチプレックス・リアルタイムPCR技術、凍結乾燥技術で構成された独自技術を用い、感染性ぶどう膜炎に対し主要病原体9項目を20μLの眼科検体から40分で検出する試薬を開発した。国内用感染性ぶどう膜炎をターゲットにしたキットを開発し、先行多施設研究を施行した。成果をまとめた論文は2021年にOphthalmology誌(IF8.2)に掲載された。産学連携による薬事申請に繋げるため、この枠組を利用した医師主導臨床性能試験を準備し、東北大学AROの支援を得て、PMDA対面助言を終了した。続いて、感染性角結膜炎・眼内炎に対する試薬を開発し、多施設評価を開始した。そしてポータブル型PCR機器に対応する試薬を開発し、基礎評価、並びに臨床検体を用いた評価を行った。現在これらの成果を学術論文にまとめている。総合的な眼感染症病因診断の臨床現場即時検査(POCT)化を成し遂げ、外来・術中など、迅速病因診断に基づく治療を可能にすることを目指している。

Infectious ぶ う う membranitis, endophthalmitis, keratoconjunctivitis blindness に to <s:1> QOLに career impact する important diseases である. The causes are ウ ウ ス ス ス, bacteria, protozoa, parasites と pluralistic にわた <s:1>, それぞれ treatment methods が pluralistic なる. Clinical see の み で は identification difficult で, etiology diagnosis は but 伝 検 check が useful で あ る が, ophthalmic 検 は trace (at least 20 mu L) で 従 検 to look up more than 300 mu (L) で は 検 volume insufficient が し た. Youdaoplaceholder0 come to 検 to check 雑で traditional 雑で popularization difficulty であった. Eye adapting just-in-time inventory に 応 seaborne す る is simple, rapid な posthumous son 伝 検 check try 薬 キ ッ ト は at home and abroad で も open 発 さ れ て お ら ず, etiology diagnosis に づ か な い blind treatment に よ る irreversible な visual handicap, side effects に bitter し む cases more than が い こ と が subject で, accurate, rapid, simple な etiology diagnosis へ の ophthalmic medical field の age-old の strong い ニ ー ズ が あ る. 2013 に "Rapid diagnosis of refractory paroxysmal eye Infection disease に versus する (PCR method)" が Advanced Medical となった. The development of 険 diagnosis and treatment に に rapid and simple で widespread <s:1> high <s:1> キット drug trials が necessary とされた. ま ず, I 々 は, nucleic acid, refined don't 検 body directly, the PCR technology, マ ル チ プ レ ッ ク ス · リ ア ル タ イ ム PCR technology, freeze drying technology で constitute さ れ た technology alone を い, infectious ぶ ど う meningitis に し seaborne main pathogens 9 projects を 20 mu L の eye 検 body か ら 40 points で 検 out す る try 薬 を open 発 し た. In China, infectious ぶ う う membranitis をタ ゲットに たキットを たキットを has been developed, and extensive research has been conducted on を implementation of た. The achievement をまとめた paper was published in にOphthalmology (IF8.2)に in 2021 された. に link-up between production よ る 薬 things apply に 繋 げ る た め, こ の を 枠 group using し た physicians dominant clinical performance test preparation を し, Northeastern University ARO の support を て, PMDA surface helps the end of the speech を seaborne し た. Youdaoplaceholder0 続 て て, infectious keratoconjunctivitis · endophthalmitis に development of する drug trials を, multiple drug administration 価を initiation of 価を た. Type そ し て ポ ー タ ブ ル PCR machine に 応 seaborne す る try 薬 を open 発 し, basic review 価, and び に clinical を 検 body with い た review 価 を line っ た. Current: れら れら れら achievements を academic papers にまとめて る る. 総 な eye adapting just-in-time inventory of etiology diagnosis の clinical point-of-care 検 check (POCT) を into し hence げ, foreign intraoperative な ど, quickly etiology diagnosis に づ く を treatment can に す る こ と を refers し て い る.

项目成果

(総説)DNA精製不要のマルチプレックスリアルタイムPCRの開発：眼科微量検体を用いた術中迅速診断

（综述）无需 DNA 纯化的多重实时 PCR 的开发：使用微量眼科标本进行快速术中诊断

• 发表时间: 2021
• 期刊: Retina Medicine10(2)
• 作者: Xiaoyan Jiang;Toshihide Kurihara;Kiwako Mori;Shin-ichi Ikeda;Hidemasa Torii and Kazuo Tsubota;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子
• 通讯作者: 中野聡子

多項目PCR検査の普及と診断率向上、予後改善 －臨床使用のポイント－

多项目PCR检测普及，提高诊断率，改善预后 - 临床使用要点 -

• 发表时间: 2023
• 作者: Xiaoyan Jiang;Toshihide Kurihara;Kiwako Mori;Shin-ichi Ikeda;Hidemasa Torii and Kazuo Tsubota;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子
• 通讯作者: 中野聡子

Multiplex Solid-Phase Real-Time Polymerase Chain Reaction without DNA Extraction for Infectious Uveitis

无需 DNA 提取的多重固相实时聚合酶链反应治疗传染性葡萄膜炎

• 发表时间: 2021
• 作者: Xiaoyan Jiang;Toshihide Kurihara;Kiwako Mori;Shin-ichi Ikeda;Hidemasa Torii and Kazuo Tsubota;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;Satoko Nakano;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野 聡子;中野 聡子;中野 聡子;中野 聡子;Nakano S.
• 通讯作者: Nakano S.

（総説）【基本から学ぶ!ぶどう膜炎診療のポイント】ぶどう膜炎の原因検索 眼内液からの検査

（回顾）【从葡萄膜炎治疗的基础开始学习】从眼内液检查寻找葡萄膜炎的原因

• 发表时间: 2022
• 期刊: OCULISTA
• 作者: Xiaoyan Jiang;Toshihide Kurihara;Kiwako Mori;Shin-ichi Ikeda;Hidemasa Torii and Kazuo Tsubota;中野聡子;中野聡子;中野聡子
• 通讯作者: 中野聡子

感染性ぶどう膜炎多項目PCR検査の普及と 診断率向上、予後改善

推广传染性葡萄膜炎多项目PCR检测，提高诊断率和预后

• 发表时间: 2022
• 作者: Xiaoyan Jiang;Toshihide Kurihara;Kiwako Mori;Shin-ichi Ikeda;Hidemasa Torii and Kazuo Tsubota;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子;中野聡子
• 通讯作者: 中野聡子