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CD302の新機能：破骨細胞の分化制御とその機構及び骨・軟骨代謝研究への展開

CD302的新功能：破骨细胞分化调控及其机制及骨软骨代谢研究进展

基本信息

批准号：
19K10053
负责人：
青山絵理子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

レクチン様ドメインを有するC型レクチン受容体の一種であるCD302の骨芽細胞における機能について明らかにするために、まず骨芽細胞系の細胞株MC3T3-E1細胞を用いて分化誘導培養を行い、分化初期である増殖期においてCD302の発現がやや上昇することを見いだした。また、細胞密度とCD302の発現の関連を調べたところ、細胞間接触と正の相関を示すことが分かった。さらに、CD302の発現を抑制したところ、細胞数が減少し、caspase3/7の活性上昇が見られた。同様に、CD302の発現抑制は細胞遊走も抑制した。これまでの結果はCD302が細胞接着および生存維持に関与していることを示していることから、接着や生存に関わる細胞内シグナル伝達因子であるFAKおよびAktについて解析したところ、CD302の発現をノックダウンした細胞ではこの両者のリン酸化が低下することも分かった。この結果はCD302が細胞接着因子と何らかの関連を有している可能性を示している。そこで、ファイブロネクチンで固相化することで培養用プレートの細胞接着性を上昇させるとCD302の発現抑制による細胞死が抑制された。これらのことからCD302はファイブロネクチンを介した細胞接着において重要な役割を果たしており、生存維持や遊走を制御する分子の一つであることが明らかになった。さらにCD302の作用機序について明らかにするためデータベースを用いてCD302の関連分子を探索したところ、ARL13Bと結合する可能性があることが分かった。ARL13Bは一次繊毛を形成する因子の一つであることからCD302と一次繊毛形成との関係を検証するため免疫染色を行った。その結果、一次繊毛の基底部にCD302の集積が見られた。このことからCD302は一次繊毛の形成に何らかの役割を担っている可能性が考えられる。

A C-type receptor is used for the differentiation and induction of MC3T3-E1 cells, and CD302 cells are used for the development and rise of MC3T3-E1 cells. The relationship between cell density and CD302 expression is modulated, and the relationship between cell-to-cell contact and expression is demonstrated. The expression of CD302 was inhibited, the number of cells decreased, and the activity of caspase3/7 increased. In the same way, CD302 expression inhibition and cell migration inhibition. As a result, CD302 is associated with cell adhesion and survival maintenance, and is associated with cell adhesion and survival maintenance. FAK and Akt are involved in the analysis of CD302, and CD302 is associated with cell adhesion and survival maintenance. These results indicate the possibility of CD302 being associated with cell adhesion factors. The cell adhesion of the culture medium is increased, and the expression of CD302 is inhibited. CD302 is a molecular marker for cell growth and survival maintenance. The mechanism of CD302 action was explored and the possibility of ARL13B binding was explored. ARL 13B is a primary hair formation factor that can be detected by immunostaining. As a result, the accumulation of CD302 at the base of the primary hair is seen. CD302 is the first time the hair is formed.