脳内炎症による行動異常に対する大脳皮質神経細胞移動の関与

大脑皮层神经元迁移参与脑内炎症引起的行为异常

• 批准号: 18K06908
• 负责人: 水野 誠
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K06908/
• 关键词: 発達障害; 炎症; 大脳皮質

ARHGEF9 (別名、Collybistin)はRho family GTPasesに対するグアニンヌクレオチド交換因子である。ARHGEF9の変異はてんかんや知的障害などの発達障害と関わっていることが報告されているが、脳発達段階におけるARHGEF9の局在についてはまだ詳細な解析がされていない。そこで本研究では発達段階の脳におけるmARHGEF9の局在を明らかにするために、mARHGEF9蛋白に対するウサギポリクローナル抗体を作製した。作製したポリクローナル抗体は、COS7細胞に過剰発現したmARHGEF9蛋白を特異的に認識した。ウエスタンブロット解析によりmARHGEF9はマウス中枢神経系を含む広い組織領域で発現し、発達段階の脳においては胎生期により高い発現が認められた。これら組織では、報告されているmARHGEF9アイソフォームより高い分子量のバンドを認識していた。免疫組織学的解析では、大脳皮質、海馬、小脳の発達段階に応じた発現局在の変化が認められた。これらの結果によりmARHGEF9は脳の発達段階で高い発現を示しており、脳発達過程に重要な役割を果たしていることが示唆された。抗体の特異性も含め今後詳細に検討していく予定である。

ARHGEF9（也称为Collybistin）是R​​ho家族GTPases的鸟嘌呤核苷酸交换因子。据报道，ARHGEF9突变与癫痫和智力障碍等发育障碍有关，但尚未对ARHGEF9在大脑发育阶段的定位进行详细分析。因此，在这项研究中，准备针对MARHGEF9蛋白的兔多克隆抗体，以阐明在发育阶段的大脑中Marhgef9的定位。产生的多克隆抗体特异性地识别了COS7细胞中过表达的MARHGEF9蛋白。 Western印迹分析表明，MARHGEF9在包括小鼠中枢神经系统在内的宽组织区域表达，并且在胎儿生活中在发育大脑中高度表达。这些组织识别分子量更高的条带比报道的MARHGEF9同工型。免疫组织学分析表明，根据大脑皮层，海马和小脑的发育阶段，表达定位的变化。这些结果表明，MARHGEF9在大脑发育阶段高度表达，并且在大脑发育过程中起着重要作用。我们计划将来详细研究，包括抗体的特异性。

项目成果

Biochemical and Morphological Characterization of a Guanine Nucleotide Exchange Factor ARHGEF9 in Mouse Tissues.

• DOI: 10.1267/ahc.18009
• 发表时间: 2018-06-26
• 期刊: Acta histochemica et cytochemica
• 影响因子: 2.4
• 作者: Ibaraki K;Mizuno M;Aoki H;Niwa A;Iwamoto I;Hara A;Tabata H;Ito H;Nagata KI
• 通讯作者: Nagata KI