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体細胞初期化におけるTET1とp53の協調作用メカニズムの解明

阐明TET1和p53在体细胞重编程中的协同机制

基本信息

批准号：
18K06833
负责人：
徳澤佳美
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K06833/
关键词：
初期化 p53 TET1 ヒトiPS細胞リプログラミング分化多能性

项目摘要

現在のヒトiPS細胞の問題点は、分化多能性の不安定さに加え、初期化の過程で遺伝子異常が生じてしまうことが挙げられる。そのため、我々の研究室では、遺伝子異常が生じず、且つ安定した分化多能性を持つヒトiPS細胞を作製する方法を模索していた。その過程において、DNA脱メチル化反応に関わるTET1遺伝子を初期化因子と共導入すると、コロニー形成数が上昇することを見出していた。他方で、遺伝子異常が生じた細胞はp53/p21経路によって排除される。この応答反応がヒトiPS細胞の作製効率を著しく低下させるため、一般にiPS細胞作製時には、p53の発現を抑制し、コロニー形成数を上昇させている。我々は、p53を抑制しない条件下でTET1を共導入してヒトiPS細胞を作製すると、p53を抑制した条件より、形成されるコロニー数は減るものの、その多くが境界の明瞭なコロニーであることを見出した。これらのことから、p53が機能することで遺伝子異常の生じた細胞が除かれ、さらにTET1を初期化因子と一緒に導入することにより、初期化がより進んだ分化多能性の高い質の良いヒトiPS細胞の取得率が向上するのではないかと考えた。本研究では、この現象を分子レベルで解析し、さらに分化多能性との関係を明らかにすることを目的とした。今年度は初年度に引き続き、TET1導入ヒトiPS細胞と非導入ヒトiPS細胞を明確に選別し、p53との関係を調べるためのベクター構築の見直しに着手した。

The problem of iPS cells is that differentiation pluripotency is unstable, and the process of initial differentiation is abnormal. The method for the production of iPS cells was modeled in our laboratory. In the process of DNA degradation, TET1 gene is involved in the initiation factor, co-introduction, and increase in the number of DNA formation. Other side, genetic abnormalities occurred in the cell p53/p21 pathway. The production efficiency of iPS cells decreased, while the production efficiency of p53 was inhibited and the production efficiency of iPS cells increased. TET1 is introduced into iPS cells under the condition that p53 is inhibited. The acquisition rate of iPS cells with high quality and good differentiation pluripotency was higher than that of TET1. The purpose of this study is to analyze the molecular structure of the phenomenon and to clarify the relationship between differentiation and pluripotency. In the beginning of this year, we started to identify the relationship between TET1-introduced iPS cells and non-introduced iPS cells.