Research on Physiological and Molecular mechanism of Eukaryotic Protein Kinase - Phosphatase System that Regulates Morphology of Clostridium perfringens

真核蛋白激酶-磷酸酶系统调控产气荚膜梭菌形态的生理和分子机制研究

• 批准号: 18K07114
• 负责人: 成谷 宏文
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Jumonji University (2020-2022)Hiroshima University (2018-2019)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K07114/
• 关键词: Clostridium perfringens; ガス壊疽菌; シグナル伝達; プロテインキナーゼ; プロテインホスファターゼ; 細胞壁生合成; タンパク質相互作用; Yeast Two-Hybrid Screen; Yeast Two- Hybrid Screen; Protein kinase; Signal transduction; Cell Morphology; Protein interaction

グラム陽性病原細菌に普遍的に存在する真核型 Protein Ser/Thr Kinase (K) - Phosphatase (P)シグナル伝達系の機能をClostridiumperfringens (ガス壊疽菌)をモデルとして解明する。我々は既に、K のリン酸化基質タンパク質としてClostridium属細菌に特異的な繰り返しタンパク質相互作用領域 (TPR) を有する膜タンパク質 (S) を同定し、そのThr-92のリン酸化調節で同菌の隔壁形成・分裂・形態（菌長）を制御することを見いだしている。また S が必須酵素: IspG（非メバロン酸経路: 細胞壁生合成に関与）と MurF (D-Ala-D-Ala Ligase:細胞壁生合成経路)との相互作用を見いだしている。本研究では、タンパク質間の相互作用がいくつも統合された高次ネットワークで行われる菌の『形態形成』における S-IspG-MurF複合体形成 と K-P 制御のメカニズムを明らかにする事を目的とする。具体的には in vivo Cross-Link 法によりS 複合体を K・P欠損株より単離し、その構成因子をLC-MS/MS により同定する。またK (二量体) の酸性アミノ酸(Glu/Asp)-Rich 領域の機能として His-Aspリン酸リレー系(Protein His Kinase) の走化性制御で知られる『メチル化Adaptation機構』を念頭に、Glu 変異株の解析、また Glu/Asp-Rich 領域との相互作用因子の同定を行う。本年度は、以下について検討を行う予定であったが、新型コロナの影響で昨年度に引き続き，まだ予備実験段階で進捗していないため，補助事業再延長を行なった。1）S の新規相互作用因子の探索：候補因子の情報収集2）他のClostridium属細菌S ホモログの比較解析/リン酸化部位決定：未実施3）K の酸性アミノ酸領域の機能解析：ツールのデザイン

The eukaryotic type Protein Ser/Thr Kinase (K)-Phosphatase (P) is commonly found in sexual pathogens. The mechanism is Clostridiumperfringens (gangrenous bacteria). In the field of interaction (TPR) of the genus Clostridium, there is membrane homology, THR-92 acidification and the formation of fission morphology (bacteria growth) in the next door of the bacteria. The enzyme IspG (non-essential acid pathway: cell wall synthesis pathway and) MurF (D-Ala-D-Ala Ligase: cell wall synthesis pathway) interact with each other. In this study, the interaction between the two systems is integrated. In the high-frequency system, the bacteria form the form and form the S-IspG-MurF complex to form a complex to control the production of the virus. The specific in vivo Cross-Link method, the S-complex, the K-P complex, the isolates, the factors, the LC-MS/MS genes, the homologues, the clones and the clones. K (binary) acid sulfonic acid (Glu/Asp)-Rich field machine is used to determine His-Asp acid system (Protein His Kinase), chemical Adaptation mechanism, Glu strain analysis, and Glu/Asp-Rich domain interaction factor analysis. In the current year and the following, the following government departments are scheduled to introduce the new model to the market last year, which will help the cause to further extend its operation. 1) Exploration of S "new regulation interaction factors": candidate factors 2) comparison analysis of other bacteria of the genus Clostridium

项目成果

Genetic characterisation of NDM-1 and NDM-5-producing Enterobacterales from retail chicken meat in Egypt

埃及零售鸡肉中产生 NDM-1 和 NDM-5 的肠杆菌的遗传特征

• DOI: 10.1016/j.jgar.2020.07.031
• 发表时间: 2020
• 期刊: Journal of Global Antimicrobial Resistance
• 影响因子: 4.6
• 作者: Sadek Mustafa;Poirel Laurent;Nordmann Patrice;Nariya Hirofumi;Shimamoto Toshi;Shimamoto Tadashi
• 通讯作者: Shimamoto Tadashi

Structures of major pilins in Clostridium perfringens demonstrate dynamic conformational change

产气荚膜梭菌主要菌毛蛋白的结构表现出动态构象变化

• DOI: 10.1107/s2059798319009689
• 发表时间: 2019
• 期刊: Acta Crystallographica Section D Structural Biology
• 作者: Tamai Eiji;Katayama Seiichi;Sekiya Hiroshi;Nariya Hirofumi;Kamitori Shigehiro
• 通讯作者: Kamitori Shigehiro

Ethanolamine utilization supports Clostridium perfringens growth in infected tissues

乙醇胺的利用支持产气荚膜梭菌在感染组织中的生长

• DOI: 10.1016/j.micpath.2018.04.017
• 发表时间: 2018
• 期刊: Microbial Pathogenesis
• 影响因子: 3.8
• 作者: Yagi Hirofumi;Nakayama-Imaohji Haruyuki;Nariya Hirofumi;Tada Ayano;Yamasaki Hisashi;Ugai Hideyo;Elahi Miad;Ono Tsuneko;Kuwahara Tomomi
• 通讯作者: Kuwahara Tomomi

Analysis of retron expression in Vibrio cholerae using GusA reporter system

使用 GusA 报告系统分析霍乱弧菌中的逆转录子表达

• 发表时间: 2020
• 作者: Hirofumi Nariya;Yinke Zhang; Ahmed M. Soliman;Toshi Shimamoto;Tadashi Shimamoto
• 通讯作者: Tadashi Shimamoto

A Novel Single-Tube Eicosaplex/Octaplex PCR System for the Detection of Extended-Spectrum β-Lactamases, Plasmid-Mediated AmpC β-Lactamases, and Integrons in Gram-Negative Bacteria.

一种新型的单管eicosaplex/八曲线PCR系统，用于检测延长的谱β-内酰胺酶，质粒介导的AMPCβ-内酰胺酶和革兰氏阴性细菌中的整合剂。

• DOI: 10.3390/antibiotics12010090
• 发表时间: 2023-01-04
• 期刊: ANTIBIOTICS-BASEL
• 影响因子: 4.8
• 作者: Soliman, Ahmed M.;Nariya, Hirofumi;Tanaka, Daiki;Shimamoto, Toshi;Shimamoto, Tadashi
• 通讯作者: Shimamoto, Tadashi