α-ヒドロキシ酪酸とその代謝産物を用いた細胞分化誘導

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2021年度に、私たちが見当をつけた、GPR81とムチン４の相互作用について、検証として、初代培養を含む12種類の細胞を用いて、新たに解析を加えた。その結果、私たちの調査した範囲では、残念ながら、GPR81とムチン４の相互作用は細胞普遍的な反応でないという結果を得てしまった。この理由として、基礎的なMUC4の発現レベルの差異や、HER2遺伝子発現レベルの差異、HER2の変異やスプライシングバリアントの存在等が考えられる。しかし、依然として、その明確な答えは得られていない。α-ヒドロキシ酪酸をはじめとするGPR81のリガンドを用いて、骨芽細胞に刺激を加えると、カルシウム活性化陰イオンチャンネルをコードしているBestrophinの遺伝子発現量が、有意に増加した。このことが、GPR81リガンドによる石灰化促進機構ではないかと考え、Bestrophin単独の作用を調べる目的で、Bestrophinが石灰化に及ぼす影響の解析を行った。その結果、骨芽細胞の培養系においてBestrophin遺伝子を、一過性に過剰発現させても、骨芽細胞の石灰化に有意な影響を及ぼさなかった。また、前駆脂肪細胞においても、脂肪滴の蓄積には有意な変化を与えなかった。その一方で、リン酸代謝に関与することが知られている、いくつかの遺伝子の発現量を有意に変化させた。この現象について、現在詳細な解析を行っている。このことは、リガンドによるGPR81の刺激は、Bestrophin遺伝子発現の増加と、その他の何らかの因子に作用することで、リン酸の取り込みを増加させ、それが石灰化を促進している可能性が示唆された。