デザインされた誘発Dicによる微小核/クロモトリプシス形成過程の解析

设计诱导Dic分析微核/染色体碎裂形成过程

• 批准号: 18K11647
• 负责人: 津山 尚宏
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K11647/
• 关键词: 二動原体染色体; 微小核; クロモトリプシス; 放射線発がん; ゲノム編集

電離放射線がゲノムDNAに引き起こすDNA二本鎖切断(DSB)の一部は、異なった切断端が再結合した場合に染色体転座や二動原体染色体などの染色体異常となる。一つの染色体に２つのセントロメアを持つ二動原体染色体および同時に生じる染色体断片は、細胞分裂終了後に細胞核に取り込まれることなく微小核(MN)形成を形成することが多く、微小核は細胞質の自然免疫応答機構を介して炎症応答を惹起し、次の細胞周期で核内に取り込まれ修復されることにより複雑に融合した異常染色体（クロモトリプシス）の原因となる。この経路を効率よく解析するために誘導実験系の確立を試みている。前年度までに作成したiCre-loxPあるいはERT2-Creでは、Dicの誘導効率が10^-7程度と低く解析に十分な細胞数を得ることができなかった。他方で一過性導入系のCRISPR-Cas9を用いた染色体異常誘導系として、多発性骨髄腫で観察される11番染色体CCND1遺伝子および14番染色体IgH遺伝子間のt(11;14), 線維形成性小細胞腫瘍の11番染色体WT1遺伝子と22番染色体EWSR1遺伝子間のt(11;22), 非小細胞肺がんの5番染色体CD74遺伝子と6番染色体ROS1遺伝子間のt(5;6)誘導時に、それぞれの特異的転座と同時に同じ組み合わせの二動原体染色体が生じていることをゲノムDNAを用いたPCRにより確認できた。Dicの消長の過程の細胞応答を効率よく調べるため、今後、Dicの生成を蛍光タンパク質の発現でモニターしDicが生じた細胞を単離できる実験系を開発し、遺伝子発現の変化の網羅的解析を試みる。

The DNA of the isolated radiation line induces the use of the first part of the ordinary DNA transection (DSB) and the end of the DNA transection, and then combines the two kinetoplasma chromosome chromosomes on the base of the chromosome pedestal, and then the chromosomes are sequenced. The chromosomes of the two kinetoplasma chromosomes were isolated simultaneously, the chromosome fragments and cell division were carried out at the same time, and the subsequent nuclei were obtained. The formation of the micronuclei (MN), the micronucleus cells and the natural immune response mechanism were used to induce inflammation. The cause of the autosomal (autosomal) in the nucleus of the cell cycle is different. Please make sure that you are sure to make sure that you have made a decision. In the previous year, the rate of iCre-loxP, Dic, and Dic was 10 ^-7 and 10%, respectively. As soon as the sexual introduction line CRISPR-Cas9 was used, the chromosomes of 11 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 11 chromosomes, WT1 chromosomes, 22 chromosomes, EWSR1 chromosomes, 22 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 22 chromosomes, 11 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 22 chromosomes, 11 chromosomes, 22 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 11 chromosomes, 14 chromosomes, 11 chromosomes, 22 chromosomes, 22 chromosomes, 11 chromosomes, 22 chromosomes, 22 chromosomes. 22) in non-small cell lung cancer, the CD74 gene of chromosome 5 and the chromosome ROS1 gene of chromosome 6 (5

项目成果

CRISPR/Cas9を用いた染色体転座t(11;14) 誘導系の作製と染色体異常解析への応用

利用CRISPR/Cas9构建染色体易位t(11;14)诱导系统并应用于染色体异常分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 津山尚宏;阿部悠;柳亜紀;菅井美咲;神谷研二;坂井晃
• 通讯作者: 坂井晃

Analysis of the number of chromosome aberrations induced by three consecutive CT examinations.

连续3次CT检查诱发的染色体畸变数量分析。

• 发表时间: 2019
• 作者: Yu Abe;Hideyoshi Noji;Misaki Sugai;Yumiko Kurosu;Naohiro Tsuyama;Aki Yanagi;Yukari Yanai;Takashi Ohba;Tetsuo Ishikawa;Tomisato Miura;Kenji Kamiya;Mitsuaki A. Yoshida;Akia Sakai
• 通讯作者: Akia Sakai

Investigation of the cumulative number of chromosome aberrations induced by three consecutive CT scans.

研究连续 3 次 CT 扫描诱发的染色体畸变累积数量。

• 发表时间: 2018
• 作者: Yu Abe;Hideyoshi Noji;Misaki Sugai;Yumiko Kurosu;Takashi Ohba;Naohiro Tsuyama;Aki Yanagi;Yukari Yanai;Tetsuo Ishikawa;Tomisato Miura;Kenji Kamiya;Mitsuaki A Yoshida;Akira Sakai
• 通讯作者: Akira Sakai

Optimization of chromosome specimen preparation for biodosimetry using chromosome aberration frequency.

使用染色体畸变频率优化用于生物剂量测定的染色体样本制备。

• 发表时间: 2021
• 作者: Naohiro Tsuyama;Yu Abe;Misaki Sugai-Takahashi;Kenichi Kudo;Yusuke Azami;Miwa Fukami;Tomisato Miura;Kenji Kamiya;Akira Sakai
• 通讯作者: Akira Sakai

Chromosomal translocation t(11;14) and p53 deletion in B cell-derived iPS cells by CRISPR/Cas9

通过 CRISPR/Cas9 在 B 细胞衍生的 iPS 细胞中进行染色体易位 t(11;14) 和 p53 缺失

• 发表时间: 2019
• 作者: Aki Yanagi;Naohiro Tsuyama;Misaki Sugai;Yu Abe;Yukari Yanai;Akinobu Ota;Karnan Sivasundaram;Lobna Alkebsi;Moe Muramatsu;Tomonari Shigemura;Megumi Sasatani;Yuko Hashimoto;Kenji Kamiya;Ichiro Hanamura;Takayuki Ikezoe;Masafumi Onodera;Akira S
• 通讯作者: Akira S