１分子追跡によるFcεRIシグナル伝達分子の機能と時空間的制御の解明

通过单分子追踪阐明 FcεRI 信号分子的功能和时空调控

• 批准号: 18K14436
• 负责人: 平本 菜央
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K14436/
• 关键词: シグナル伝達; １分子イメジング; 免疫反応; １分子追跡法; ライブイメジング; 免疫応答

本研究では、『１分子追跡によるFcεRIシグナル伝達分子の機能と時空間的制御の解明』について、以下の研究を行うことを目的とした。①免疫FcεRIシグナル伝達経路における「CD6」と「SLP-76」の機能を１分子追跡法で調べる。１分子イメジングを用いて、FcεRIシグナル下において、CD6とSLP-76がどのような位置関係にあるのか、検討を行う。②マスト細胞内シグナル伝達における「時空間的制御機構」を解明する。CD6、SLP-76とその下流エフェクター分子に関して、FcεRIシグナル入力後、「いつ」「どこで」「どれくらいの時間」分子相互作用がなされているのか、１分子追跡法を用いて検討する。背景として、SLP-76はFcεRIが抗原刺激されるとリン酸化され、リン酸化SLP-76が下流にシグナルを伝達することで、マスト細胞活性化シグナルを促進している。また、これまでFcεRIシグナル伝達経路内において、CD6の関与は報告されていない。これまで①と②の研究を推進し、以下の進捗があった。① CD6とFcεRIは抗原刺激下で共局在する。 (2) CD6は刺激前後ともに、SLP-76やSLP-76の結合分子であるGadsと一時的に共局在する。 (3) FcεRIとSLP-76は刺激有無に関わらず共局在はみられない。② (4) CD6は、SLP-76やSykキナーゼに対する、脱リン酸化分子とは共局在しない。 (5) CD6とアクチン結合分子Ezrinは一時的に共局在する。(6) FcεRIとEzrinは刺激後において共局在する。(7) 刺激後にFcεRIが細胞膜上で停留するが、アクチンとの明確な関連まではわからなかった。

The purpose of this study is to achieve the control of molecular energy time and space by molecular tracking Fc ε RI. 1 immunized with Fc ε RI antigens, immunized with "CD6" and "SLP-76" antibodies. Molecular tracking method was used to detect DNA fragments. 1. The molecular weight is different from that of Fc ε RI, CD6SLP-76 and CD6SLP-76, respectively. (2) the control mechanism of time and space can be verified by the control mechanism of time and space in the cell. The molecular interaction between CD6 and SLP-76 is sensitive to the molecular interaction, and the 1 molecular tracking method is used in the molecular tracking method. After the introduction of the force of the Fc ε-RI, the molecular interaction between the two molecules is analyzed. Background: SLP-76, Fc ε RI, antigen stimulation, acidification, SLP-76 acidification, cell activation, cell activation, and cell activation. Please tell me that the Fc ε RI has reached the level of traffic, CD6, and reports. In the first two years of the study, the study will be promoted and the following will be reviewed. 1 under the stimulation of CD6 "Fc ε RI" antigen, the cells were co-located. (2) the response of CD6 stimulation before and after stimulation and the combination of SLP-76 SLP-76 stimulation and molecular Gads stimulation were in the same place. (3) the stimulation of Fcε RIXSLP-76 showed that there was no significant difference between Fcε and SLP-76. 2 (4) CD6, SLP-76, Syk, and deacidified molecules are co-located. (5) the co-operation of the combination of CD6 and molecular Ezrin is in progress. (6) after the stimulation of Fc ε RI "Ezrin", there is a common situation between the two groups. (7) after stimulation, the membrane of Fc ε RI cells remained intact, and there was no obvious change in the cell membrane.

项目成果

Three-dimensional membrane platform for signaling in immune cells

用于免疫细胞信号传导的三维膜平台

• 发表时间: 2019
• 作者: ○Hirosawa K.M.;Hiramoto-Yamaki N.;Yoshida K.J.;Nozaki S.;Tsunoyama T.A.;Tang B.;Suzuki K.G.N.;Nakayama K.;K. Fujiwara T.K.;Kusumi A.
• 通讯作者: Kusumi A.

Fast and slow turnover of AMPA receptor and stargazin in the spine in the time scale of 0.1 s to several 100 s; unraveling by single molecule imaging

脊柱中 AMPA 受体和观星蛋白在 0.1 秒到几百秒的时间尺度内快速和缓慢的周转；

• 发表时间: 2019
• 作者: ○Nemoto Y.L.;Naito K.;Hijikata H.;Tsunoyama T.A.;Hiramoto-Yamaki N.;Kasai R.S.;Shirai Y.M.;Miyahara M.S.;Fujiwara T.K.;Kusumi A.
• 通讯作者: Kusumi A.

DYNAMIC REGULATION OF AMPA RECEPTOR AND STARGAZIN CONCENTRATION IN THE SPINE IN THE TIME SCALE OF 0.1 S TO SEVERAL 100 S; UNRAVELING BY SINGLE-MOLECULE TRACKING.

0.1 S至数百S时间尺度内脊柱中AMPA受体和STARGAZIN浓度的动态调节

• 发表时间: 2019
• 作者: ○Nemoto Y.L.;Naito K.;Hijikata H.;Tsunoyama T.A.;Hiramoto-Yamaki N.;Kasai R.S.;Shirai Y.M.;Miyahara M.S.;Fujiwara T.K.;Kusumi A.
• 通讯作者: Kusumi A.

LAT VESICLES WORK AS A SIGNAL TRANSDUCTION PLATFORM IN IMMUNE CELLS; UNRAVELING BY SINGLE-MOLECULE IMAGING.

LAT 囊泡在免疫细胞中充当信号转导平台；

• 发表时间: 2019
• 作者: ○Hirosawa K.M.;Hiramoto-Yamaki N.;Yoshida K.J.;Nozaki S.;Tsunoyama T.A.;Tang B.;Suzuki K.G.N.;Nakayama K.;K. Fujiwara T.K.;Kusumi A.
• 通讯作者: Kusumi A.

100分子ほどの膜貫通足場タンパクLAT がマスト細胞の免疫反応を担っている (Only ~100 copies of a transmembrane scaffolding protein LAT are responsible in the immune response in mast cells)

只有约 100 个跨膜支架蛋白 LAT 拷贝负责肥大细胞的免疫反应

• 发表时间: 2018
• 作者: ○Hirosawa K.M.;Hiramoto-Yamaki N.;Nozaki S.;Tsunoyama T.A.;Tang B.;Suzuki K.G.N.;Nakayama K.;K. Fujiwara T.K.;Kusumi A.
• 通讯作者: Kusumi A.