Significance of PVT1-MYC chimeric gene in refractory hematological malignancies

PVT1-MYC嵌合基因在难治性血液恶性肿瘤中的意义

• 批准号: 18K15281
• 负责人: 名越 久朗
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K15281/
• 关键词: PVT1; ノンコーディングRNA; MYC; 難治性造血器腫瘍; キメラ遺伝子

研究期間中、①造血器腫瘍におけるVT1-MYC融合遺伝子の機能的意義を解明するために、PVT1-MYC融合遺伝子が発現していないリンパ系造血器腫瘍の細胞株に同融合遺伝子を強制発現させ、その表現型の変化について解析することを前年度に引き続き継続した。悪性リンパ腫(ML)や多発性骨髄腫(MM)の細胞株を複数用いて、PVT1のexon 1とMYCのexon 2にそれぞれ設定したプライマーによるreverse-transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)法でスクリーニングをすると、いくつかの細胞株で転写産物が得られた。その転写産物については、ダイレクトシークエンスによりPVT1のexon 1とMYCのexon 2が融合した塩基配列であることが確認でき、MLやMMではPVT1とMYCが融合した異常な遺伝子が発現していると考えられる。患者検体で解析できるよう再現性の確認をするが、RT-PCRの結果が一定せず、RT-PCRの条件設定の調整するが、安定した結果は得られなかった。また、用いるプライマーを変更したり、融合遺伝子の発現が微量であることも推測し、得られたPCR産物でもう一度遺伝子を増幅されるnested PCR法を用いて検出方法の確立を試みたが、やはり安定した結果は得られなかった。また、②PVT1-MYC融合遺伝子の臨床的意義を検討するために、患者検体および臨床情報を用いた解析ができるよう、倫理委員会承認の手続きを進め、当科で加療中の悪性リンパ腫、多発性骨髄腫患者の臨床情報を収集したが、臨床業務が多忙となり、研究成果が得られず、研究を中止した。

During the study period,(1) the functional significance of VT1-MYC fusion gene in hematopoietic tumors was clarified,(2) the expression of PVT1-MYC fusion gene was detected,(3) the expression of VT1-MYC fusion gene in hematopoietic tumor cell lines under stress, and (4) the phenotypic transformation of VT1-MYC fusion gene was analyzed. Cell lines from Ml and MM were used in multiple applications, PVT1 and MYC exon 1 and exon 2 were set up for reverse-transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR), and the product was obtained from Ml and MM cells. All the products are written in the following ways: PVT1 exon 1 MYC exon 2 fusion base alignment is confirmed ML MM PVT1 MYC fusion anomaly is found The reproducibility of patient analysis was confirmed, RT-PCR results were determined, RT-PCR condition settings were adjusted, and results were stable. The method of PCR was established and the results were stable. (2) Clinical significance of PVT1-MYC fusion gene is discussed, patient profile and clinical information are analyzed, Ethics Committee acknowledges the progress of the study, Clinical information of patients with multiple osteoma is collected, Clinical business is busy, Study results are not obtained, Study is discontinued.