変形性関節症原因因子Asporinに対する阻害ペプチドの分子標的薬としての可能性

抑制肽作为骨关节炎致病因素阿孢菌素分子靶向药物的可能性

• 批准号: 18K17269
• 负责人: 糸日谷 佳菜子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K17269/
• 关键词: Asporin; TGF-beta; peptide; 骨; 軟骨; asporin

顎関節症は疼痛や開口障害、咀嚼障害を伴う疾患であり、高い罹患率を有するが、根本的な原因については不明な点が多く、治療法も確立されていない。近年、変形性関節症（OA）の原因遺伝子としてAsporinが同定され、申請者はこれまで、咬合機能低下により歯根膜でのAsporin発現が抑制される結果TGF-bのシグナル伝達が増強され歯槽骨新生が生じることを明らかとした。さらに当研究室では、OA自然発症マウス顎関節でAsporinが強発現し、これがOA病態増悪に関与するという結果を得ていることから、Asporinの生理活性阻害で骨・軟骨代謝の恒常性を維持できることが示唆される。そこで本研究は、AsporinのTGF-bへの結合を抑制するペプチド（Asporin阻害ペプチド）を構築し、それが骨・軟骨代謝恒常性を維持する分子標的薬として用いる可能性について研究を行った。in silicoにおいて、TGF-bのcoding sequenceのうち、Asporinと結合する可能性が高い領域および低い領域を10アミノ酸残基以下で選択し、ポリペプチドを合成した。その後、in vitroにおいてリコンビナントAsporinとAsporin阻害ペプチドの結合・解離試験を遂行した。現時点で得られた結果は以下の通りである。①in vitro assay（結合解離試験）を行う上で、リコンビナントAsporin、リコンビナントTGF-beta、Asporin阻害ペプチドについて最適な濃度範囲を絞り込んだ。②①の濃度において、現在、各Asporin阻害ペプチドがどの程度リコンビナントAsporinと結合するのか、リコンビナントAsporinとリコンビナントTGF-betaとの結合をどの程度阻害できるかについて比較検討を行った。

The symptoms include open mouth obstruction, masticatory disorder associated with disease, high attack rate, unknown causes and multiple symptoms, and the treatment is effective. In recent years, the cause of dysplastic disorder (OA) is the same as that of the Asporin, the applicant, and the occlusal machine can lower the root membrane membrane and Asporin. The results showed that the results of the TGF-b test showed that the alveolar bone was significantly improved. The results of laboratory test, OA disease test, Asporin stress test, OA disease test and disease test showed that the physiological activity of Asporin hindered the maintenance of bone turnover in bone cells. In this study, we studied the possibility of the combination of recombinant human transforming growth factor (Asporin) and human bone growth factor (Asp) in order to inhibit the growth of tumor cells and to maintain the molecular weight of constant growth factors. The combination of in silico, TGF-b, coding sequence, and Asporin is highly probable, low in field, 10% in acid residue and less than 10% in acid residue. After the operation, the in vitro will make sure that the Asporin is blocked by Asporin and the quarantine control will be completed. At some point in time, please check the results below. 1in vitro assay (combination of quarantine devices) is available on the Internet, and it is sensitive to TGF-beta, Asporin, and so on. 21. The accuracy, the current, the level of Asporin damage, the combination of Asporin and Asporin, the accuracy of TGF-beta, the degree of impact, the level of impact, the degree of impact, the level of TGF-beta, the degree of impact, the level of impact, the degree of impact, the level of impact, the degree of impact, the level of impact