実験モデルを用いた肺非結核性抗酸菌症の疾患感受性遺伝子の機能解析

利用实验模型对肺非结核分枝杆菌疾病易感基因进行功能分析

基本信息

  • 批准号:
    18J02173
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.83万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2018
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2018-04-25 至 2021-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

共同研究で実施している肺非結核性抗酸菌(NTM)症に関するゲノムワイド関連解析において候補SNPおよび疾患感受性遺伝子Xが同定された。肺NTM症の疾患感受性遺伝子Xが恒常的に検出されていることがデータベースで確認されている、ヒト上皮細胞株H292細胞株に対して、Mycobacterium avium subsp. Hominissuis (MAH)104株を感染させ、菌の細胞内への取り込みおよびその後の細胞内増殖の変化、疾患感受性遺伝子Xの変動を経時的に確認した。菌に関しては培養およびチールニールゼン染色で評価した。その後同様の実験をsiRNAによるknockdown(KD)、プラスミドによるoverexpression(OE)を試み施行した。それぞれの遺伝子のKDおよびOEは確認したものの、菌量および遺伝子発現の明確な差は検出できなかった。同様の実験をヒト気道上皮株であるBEAS2Bで施行したが、同様に明確な差が得られなかった。ヒト末梢血単核球細胞(PBMC)に対する経時的な感染実験においても候補遺伝子をいくつか検討したが、明確な上昇を得ることはできなかった。その後、Primary Human Bronchial Epithelial Cellsの培養系において遺伝子Xの発現を確認し、電気穿孔法を用いたCRISPR-Cas9およびgRNAの導入により遺伝子Xのノックアウト株の樹立に成功した。今後、気相液相界面培養(ALI)による分化後の変化を検討する予定である。また、同細胞の培養系において、レンチウイルスを用いた過剰発現の系も実施予定である。また、肺組織において同遺伝子の発現局在を確認した。今後は疾患肺との比較を行う予定である。
A collaborative study was conducted to identify candidate SNP and disease-susceptible gene X associated with pulmonary nontuberculous acid-fast bacteria (NTM). Disease susceptibility gene X of pulmonary NTM was identified as a constant marker in human lung epithelial cell line H292 and Mycobacterium avium subsp. Hominissuis (MAH)104 strains were identified during infection, intracellular selection and subsequent intracellular proliferation, and activation of disease-susceptible gene X. The bacteria were cultured and stained. The same sequence of siRNA knockdown(KD) and overexpression(OE) was attempted. The number of bacteria and the number of organisms found in the virus are confirmed. The same is true for the BEAS2B. Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) are the most common candidate for infection in the world. After that, the expression of gene X in culture system of Primary Human Bronchial Epithelial Cells was confirmed, and the expression of gene X was successfully established by electroporation method using CRISPR-Cas9 and gRNA. In the future, the transformation of the liquid phase interface culture (ALI) will be discussed The culture system of the same cell was established. The discovery of the lung tissue is confirmed. From now on, the lung will be compared and determined.

项目成果

期刊论文数量(42)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Pneumothorax associated with giant bullous emphysema and mediastinum deviation
气胸伴有巨大大疱性肺气肿和纵隔偏斜
  • DOI:
    10.1136/bcr-2019-230353
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0.9
  • 作者:
    Horiuchi Kohei;Asakura Takanori;Ochi Junichi;Saito Fumitake
  • 通讯作者:
    Saito Fumitake
肺Mycobacterium aviumcomplex(MAC)症における抗重力筋評価の意義
抗重力肌评估在肺分枝杆菌复合群 (MAC) 疾病中的意义
  • DOI:
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    朝倉 崇徳;山田 祥岳;鈴木 翔二;南宮 湖;岡森 慧;楠本 竜也;新島 友輝;八木 一馬;鎌田 浩史;舩津 洋平;石井 誠;陣崎 雅弘;別役 智子;長谷川 直樹
  • 通讯作者:
    長谷川 直樹
S1P受容体修飾薬はリンパ球減少とCD11b+Gr-1+細胞増加を誘導し肺気腫の進展を改善する
S1P受体调节剂诱导淋巴细胞减少和CD11b+Gr-1+细胞增加并改善肺气肿的进展
  • DOI:
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    朝倉 崇徳;長谷川直樹;朝倉 崇徳
  • 通讯作者:
    朝倉 崇徳
Clarithromycin expands CD11b+Gr-1+ cells via the STAT3/Bv8 axis to ameliorate lethal endotoxic shock and post-influenza bacterial pneumonia.
  • DOI:
    10.1371/journal.ppat.1006955
  • 发表时间:
    2018-04
  • 期刊:
  • 影响因子:
    6.7
  • 作者:
    Namkoong H;Ishii M;Fujii H;Yagi K;Asami T;Asakura T;Suzuki S;Hegab AE;Kamata H;Tasaka S;Atarashi K;Nakamoto N;Iwata S;Honda K;Kanai T;Hasegawa N;Koyasu S;Betsuyaku T
  • 通讯作者:
    Betsuyaku T
Superior Vena Cava Syndrome
上腔静脉综合征
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朝倉 崇徳其他文献

MALDI-TOF MSによるS.aureusの解析.
通过 MALDI-TOF MS 分析金黄色葡萄球菌。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
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    0
  • 作者:
    加茂 徹郎;田坂 定智;朝倉 崇徳;鈴木 翔二;八木 一馬;南宮 湖;徳田 百合子;藤原 宏;石井 誠;長谷川 直樹;別役 智子;杉田香代子,高野八百子,長谷川直樹,岩田敏
  • 通讯作者:
    杉田香代子,高野八百子,長谷川直樹,岩田敏
抗IFNγ中和自己抗体が検出された播種性NTM症の3例
检测到抗IFNγ中和自身抗体的播散性NTM病三例
  • DOI:
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    南宮 湖;西村 知泰;中村 朗;朝倉 崇徳;鈴木 翔二;加茂 徹郎;鎌田 浩史;石井 誠;長谷川 直樹;別役 智子
  • 通讯作者:
    別役 智子
非結核性抗酸菌症の臨床
非结核分枝杆菌疾病的临床实践
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森本 耕三;中川 拓;森野 英里子;浅見 貴弘;長谷 衣佐乃;松田 周一;林 悠太;辻本 佳恵;藤原 宏;佐々木 結花;小川 賢二;高崎 仁;南宮 湖;倉島 篤行;星野 仁彦;石井 誠;後藤 元;朝倉 崇徳;青野 昭男;長谷川 直樹;御手洗 聡;長谷川 直樹
  • 通讯作者:
    長谷川 直樹
肺炎球菌感染における間葉系幹細胞の投与効果
间充质干细胞给药对肺炎球菌感染的影响
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    浅見 貴弘;石井 誠;南宮 湖;八木 一馬;鈴木 翔二;朝倉 崇徳;加茂 徹郎;藤原 宏;西村 知泰;田坂 定智;長谷川 直樹;別役 智子
  • 通讯作者:
    別役 智子
感染症診療・制御における迅速診断ーその可能性と課題
传染病治疗和控制中的快速诊断——可能性和挑战
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森本 耕三;中川 拓;森野 英里子;浅見 貴弘;長谷 衣佐乃;松田 周一;林 悠太;辻本 佳恵;藤原 宏;佐々木 結花;小川 賢二;高崎 仁;南宮 湖;倉島 篤行;星野 仁彦;石井 誠;後藤 元;朝倉 崇徳;青野 昭男;長谷川 直樹;御手洗 聡;長谷川 直樹;長谷川 直樹
  • 通讯作者:
    長谷川 直樹

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    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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作者:{{ showInfoDetail.author }}

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