実験モデルを用いた肺非結核性抗酸菌症の疾患感受性遺伝子の機能解析
利用实验模型对肺非结核分枝杆菌疾病易感基因进行功能分析
基本信息
- 批准号:18J02173
- 负责人:
- 金额:$ 2.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2018
- 资助国家:日本
- 起止时间:2018-04-25 至 2021-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
共同研究で実施している肺非結核性抗酸菌(NTM)症に関するゲノムワイド関連解析において候補SNPおよび疾患感受性遺伝子Xが同定された。肺NTM症の疾患感受性遺伝子Xが恒常的に検出されていることがデータベースで確認されている、ヒト上皮細胞株H292細胞株に対して、Mycobacterium avium subsp. Hominissuis (MAH)104株を感染させ、菌の細胞内への取り込みおよびその後の細胞内増殖の変化、疾患感受性遺伝子Xの変動を経時的に確認した。菌に関しては培養およびチールニールゼン染色で評価した。その後同様の実験をsiRNAによるknockdown(KD)、プラスミドによるoverexpression(OE)を試み施行した。それぞれの遺伝子のKDおよびOEは確認したものの、菌量および遺伝子発現の明確な差は検出できなかった。同様の実験をヒト気道上皮株であるBEAS2Bで施行したが、同様に明確な差が得られなかった。ヒト末梢血単核球細胞(PBMC)に対する経時的な感染実験においても候補遺伝子をいくつか検討したが、明確な上昇を得ることはできなかった。その後、Primary Human Bronchial Epithelial Cellsの培養系において遺伝子Xの発現を確認し、電気穿孔法を用いたCRISPR-Cas9およびgRNAの導入により遺伝子Xのノックアウト株の樹立に成功した。今後、気相液相界面培養(ALI)による分化後の変化を検討する予定である。また、同細胞の培養系において、レンチウイルスを用いた過剰発現の系も実施予定である。また、肺組織において同遺伝子の発現局在を確認した。今後は疾患肺との比較を行う予定である。
Joint research で be applied し て い る pulmonary non-tuberculosis acid bacteria (NTM) disease に masato す る ゲ ノ ム ワ イ ド masato even parsing に お い て alternate SNP お よ び disease susceptibility heritage 伝 sub X が be さ れ た. Traces of NTM lung disease の disease susceptibility 伝 sub X が constant に 検 out さ れ て い る こ と が デ ー タ ベ ー ス で confirm さ れ て い る, ヒ ト epithelial cell lines H292 cell lines に し seaborne て, Mycobacterium avium subsp. Hominissuis (MAH) 104 strains を infection さ せ の cells, bacteria へ の take り 込 み お よ び そ の の cells raised after colonization の variations, the traces of disease susceptibility 伝 sub X の - move を 経 に confirmation when し た. Bacterial に relations, て, て culture, およびチ, <s:1>, ニ, ゼ, ゼ staining, で evaluation, 価, た, た. With others after そ の の be 験 を siRNA に よ る knockdown (KD), プ ラ ス ミ ド に よ る overexpression (OE) execute し を try み た. そ れ ぞ れ の posthumous son 伝 の KD お よ び OE は confirm し た も の の, bacteria amount お よ び heritage 伝 poor child 発 の now clear な は 検 out で き な か っ た. With others in の be 験 を ヒ ト 気 way epithelial strains で あ る BEAS2B で imposed し た が, with others in に な poor が must clear ら れ な か っ た. 単 nuclear ball ヒ ト peripheral blood cells (PBMC) に す seaborne る 経 な infection when be 験 に お い て も alternate heritage 伝 son を い く つ か beg し 検 た が, clearly rising な を る こ と は で き な か っ た. After そ の, Primary Human Bronchial Epithelial Cells の training department に お い て heritage 伝 sub X の 発 を now confirm し, 気 perforation method を い た CRISPR - Cas9 お よ び gRNA の import に よ り heritage 伝 sub X の ノ ッ ク ア ウ ト strains の set に successful し た. In the future, after the による differentiation of the gas-liquid interface culture (ALI), the <s:1> variation を検 is to be determined by する である. Youdaoplaceholder0, the same cell <s:1> culture line にお にお て て, レ <s:1> チウ スを スを スを スを スを スを スを スを スを was developed by <s:1> た to determine である. Youdaoplaceholder0, にお て て of lung tissue and 伝 of 伝 are found in を to confirm た. In the future, the と <s:1> of the affected lung will be compared with を to う determine である.
项目成果
期刊论文数量(42)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Pneumothorax associated with giant bullous emphysema and mediastinum deviation
气胸伴有巨大大疱性肺气肿和纵隔偏斜
- DOI:10.1136/bcr-2019-230353
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0.9
- 作者:Horiuchi Kohei;Asakura Takanori;Ochi Junichi;Saito Fumitake
- 通讯作者:Saito Fumitake
肺Mycobacterium aviumcomplex(MAC)症における抗重力筋評価の意義
抗重力肌评估在肺分枝杆菌复合群 (MAC) 疾病中的意义
- DOI:
- 发表时间:2018
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:朝倉 崇徳;山田 祥岳;鈴木 翔二;南宮 湖;岡森 慧;楠本 竜也;新島 友輝;八木 一馬;鎌田 浩史;舩津 洋平;石井 誠;陣崎 雅弘;別役 智子;長谷川 直樹
- 通讯作者:長谷川 直樹
S1P受容体修飾薬はリンパ球減少とCD11b+Gr-1+細胞増加を誘導し肺気腫の進展を改善する
S1P受体调节剂诱导淋巴细胞减少和CD11b+Gr-1+细胞增加并改善肺气肿的进展
- DOI:
- 发表时间:2018
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:朝倉 崇徳;長谷川直樹;朝倉 崇徳
- 通讯作者:朝倉 崇徳
Clarithromycin expands CD11b+Gr-1+ cells via the STAT3/Bv8 axis to ameliorate lethal endotoxic shock and post-influenza bacterial pneumonia.
- DOI:10.1371/journal.ppat.1006955
- 发表时间:2018-04
- 期刊:
- 影响因子:6.7
- 作者:Namkoong H;Ishii M;Fujii H;Yagi K;Asami T;Asakura T;Suzuki S;Hegab AE;Kamata H;Tasaka S;Atarashi K;Nakamoto N;Iwata S;Honda K;Kanai T;Hasegawa N;Koyasu S;Betsuyaku T
- 通讯作者:Betsuyaku T
Superior Vena Cava Syndrome
上腔静脉综合征
- DOI:10.1093/qjmed/hcz055
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Horiuchi Kohei;Asakura Takanori;Saito Fumitake
- 通讯作者:Saito Fumitake
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朝倉 崇徳其他文献
MALDI-TOF MSによるS.aureusの解析.
通过 MALDI-TOF MS 分析金黄色葡萄球菌。
- DOI:
- 发表时间:
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- 作者:
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抗IFNγ中和自己抗体が検出された播種性NTM症の3例
检测到抗IFNγ中和自身抗体的播散性NTM病三例
- DOI:
- 发表时间:
2016 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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非結核性抗酸菌症の臨床
非结核分枝杆菌疾病的临床实践
- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
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- 作者:
森本 耕三;中川 拓;森野 英里子;浅見 貴弘;長谷 衣佐乃;松田 周一;林 悠太;辻本 佳恵;藤原 宏;佐々木 結花;小川 賢二;高崎 仁;南宮 湖;倉島 篤行;星野 仁彦;石井 誠;後藤 元;朝倉 崇徳;青野 昭男;長谷川 直樹;御手洗 聡;長谷川 直樹 - 通讯作者:
長谷川 直樹
肺炎球菌感染における間葉系幹細胞の投与効果
间充质干细胞给药对肺炎球菌感染的影响
- DOI:
- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
浅見 貴弘;石井 誠;南宮 湖;八木 一馬;鈴木 翔二;朝倉 崇徳;加茂 徹郎;藤原 宏;西村 知泰;田坂 定智;長谷川 直樹;別役 智子 - 通讯作者:
別役 智子
インフルエンザウイルス感染後肺炎球菌2次感染マウスにおけるHDAC阻害薬 TSAの保護的効果
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- DOI:
- 发表时间:
2016 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
八木 一馬;石井 誠;南宮 湖;朝倉 崇徳;鈴木 翔二;藤原 宏;西村 知泰;加茂 徹郎;田坂 定智;岩田 敏;長谷川 直樹;別役 智子 - 通讯作者:
別役 智子
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