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Study on the prevention mechanism of food factors against impaired cognition

食物因素对认知障碍的预防机制研究

基本信息

批准号：
22KF0289
负责人：
松井利郎
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0289/
关键词：
認知症神経細胞食品因子

项目摘要

認知改善に働く食品成分を究明し、その発現機構を明示するため、神経細胞を用いた評価系の構築を行った。本年度は、この達成のために、マウス神経幹細胞NE-4C（passage 6 ~ 7）を用いて、分化誘導因子としてレチノイン酸刺激を4日間実施し、神経細胞へと分化させた神経細胞を種々の実験に供した。本細胞での抗認知作用を示す生理活性ペプチドTyr-Proのアセチルコリン系亢進作用とその作用機構を明らかにするためには、本系の中心となるアセチルコリン量を定量的に評価する必要がある。そこで、LC-TOF/MS分析法による直接的なアセチルコリン量測定系の構築を図った。誘導化することなく低分子かつ高極性のアセチルコリン（146.1176 m/z）をイオン化検出するため、ミックスイオンモードのLCカラムであるImtakt Scherzo SS-C18が最適であることを突き止め、さらにアセトニトリル系溶離液へのイオン対試薬であるギ酸アンモニウム（50 mM)添加が有効であること、内標準としてアセチルコリン-d4（150.1523 m/z)を用いた定量分析が最良であるとの結果を得た。本MS分析系の確立によって、溶液中のアセチルコリン量を1 nM濃度以上で定量可能となった。そこで、20 microMのTyr-ProをNE-4C細胞に添加し、48時間培養後の細胞破砕液を用いて定量分析を行った結果（タンパク質料で補正）、1.5倍のアセチルコリン産生量の有意な増大（P < 0.01）が認められた。以上の結果、当該ペプチドは神経細胞でのアセチルコリン系の賦活に直接的に関わっていることが明らかとなった。

Know how to improve the composition of food products, and that the organization has made it clear that it is necessary to make sure that it is used to improve the composition of food products. This year, the cells of NE-4C (passage 6-7) have been used for the first time, differentiation factors have been activated by acid stimulation, and the cells have been divided into several types of cells. The anti-knowledge effect of this enzyme indicates that the physiological activity of the cell is increased, and the mechanism of action is clear that it is necessary to quantify the amount of Tyr-Pro in the center of the system. The method of LC-TOF/MS analysis is used to determine the accuracy of the measurement system. Low molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, high molecular In the internal standard, the results of quantitative analysis of the best results were obtained by quantitative analysis of the internal standard (150.1523 m