ALK阻害薬治療に起因した腫瘍微小環境の変化が誘導する薬剤耐性メカニズムの解明

阐明 ALK 抑制剂治疗引起的肿瘤微环境变化引起的耐药机制

• 批准号: 22KJ2703
• 负责人: 水田 隼斗
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2703/
• 关键词: 薬剤耐性; ALK; 肺がん; 分子標的薬

本研究では、ある受容体型チロシンキナーゼを介したALK阻害薬耐性メカニズムを検討するために、過剰発現細胞株を、購入可能なALK融合遺伝子陽性肺がん細胞株や患者由来のALK肺がん細胞株を用いて樹立し、細胞レベル及びマウスモデルを用いて研究を行った。細胞レベルの検討では、親株であるALK陽性肺がん細胞株と、過剰発現細胞株を用いて、ALK阻害薬への感受性を精査した。また、受容体の活性調節によりどのような影響が認められるかについても検討した。結果として、ALK阻害薬への感受性が活性を調節することで影響されることが確認された。また、上記のALK陽性肺がん細胞株を免疫不全マウスに移植したモデル（マウスモデル）を用いてALK阻害薬感受性への影響や、耐性出現に対する影響を確認した。その結果、細胞レベルの実験で得られたものと同様の結果が確認された。その際の腫瘍に含まれる細胞を、マルチカラーフローサイトメトリーで解析したり、ALK阻害薬による治療実験で残存した腫瘍を用いたRNAシーケンス解析を行った。その結果、ALK阻害薬治療により、宿主のある特定の細胞（宿主マウス由来の免疫関連細胞など）が集積してくる様式が明らかになった。さらに集積してきた細胞の種類をRNAシーケンスデータから推定する解析手法などを組み合わせることで、抵抗性に関与する宿主因子の解析を進めることができた。これらの研究により、ALK融合遺伝子陽性肺がんにおいて、ALK阻害薬暴露時の腫瘍細胞自身の変化だけでなく、腫瘍微小環境中の宿主細胞の変化が、薬剤耐性の誘導に寄与する可能性が示唆された。今後より詳細な解析により、抵抗性に関わる因子を併用阻害することで、獲得耐性出現を未然に防げるような治療につながる可能性があり、今後新規治療法開発へとつながることが期待される。

在这项研究中，为了研究通过受体型酪氨酸激酶的ALK抑制剂耐药性的机制，使用可用的ALK融合基因阳性肺癌细胞系和患者来源的ALK肺癌细胞系建立了过表达的细胞系，并使用细胞水平和小鼠模型研究了细胞系。在细胞水平的研究中，父母菌株，碱阳性肺癌细胞系和过表达的细胞系被用来密切检查其对碱抑制剂的敏感性。我们还研究了受体活性调节的影响。结果，已经确认对碱抑制剂的敏感性受调节活性的影响。此外，使用模型（小鼠模型）将上述ALK阳性肺癌细胞系移植到免疫功能低下的小鼠中，确认对ALK抑制剂易感性的影响和耐药性的发生。结果被证实与细胞级实验中获得的结果相似。此时，使用多色流式细胞仪分析了肿瘤中包含的细胞，并使用ALK抑制剂治疗实验中剩余的肿瘤进行了RNA测序分析。结果，已经揭示了当进行ALK抑制剂治疗时，宿主中某些细胞（例如源自宿主小鼠的免疫相关细胞）的方式。此外，通过结合分析方法来估计RNA序列数据的累积细胞类型，我们能够进步对抗电阻涉及的宿主因子的分析。这些研究表明，暴露于ALK抑制剂后肿瘤细胞本身的变化可能有助于诱导ALK融合基因阳性肺癌中的耐药性，以及肿瘤微环境中宿主细胞的变化。将来，更详细的分析将导致可以通过结合与抗性有关的抑制因素来防止获得的抗药性的治疗方法，并且预计这将导致未来的新疗法发展。

项目成果

Preclinical activity of NVL-655 in a patient-derived NSCLC model with lorlatinib-resistant ALK G1202R/T1151M mutation

NVL-655 在劳拉替尼耐药 ALK G1202R/T1151M 突变的患者衍生 NSCLC 模型中的临床前活性

• 发表时间: 2022
• 作者: Hayato Mizuta;Ludovic Bigot;Anupong Tangpeerachaikul;Henry E. Pelish;Luc Friboulet
• 通讯作者: Luc Friboulet

DPY19L3 enhances vasculogenic mimicry through its C-mannosyltransferase property

DPY19L3 通过其 C-甘露糖基转移酶特性增强血管生成拟态

• 发表时间: 2022
• 作者: Hassan Baydoun;加茂広貴;川原遼太;水田隼斗;清水史郎
• 通讯作者: 清水史郎

Preclinical activity of NVL-655 in patient-derived models of ALK cancers, including those with lorlatinib-resistant G1202R/L1196M compound mutation

NVL-655 在患者衍生的 ALK 癌症模型中的临床前活性，包括那些具有 lorlatinib 耐药性 G1202R/L1196M 化合物突变的模型

• 发表时间: 2022
• 作者: Toshio Fujino;Linh Nguyen;Satoshi Yoda;Mira Yu;Hayato Mizuta;Ludovic Bigot;Catline Nobre;Anupong Tangpeerachaikul;Henry E. Pelish;Luc Friboulet;Jii Bum Lee;Byoung Chul Cho;Aaron Hata
• 通讯作者: Aaron Hata

Novel ALK inhibitor NVL-655 has potent preclinical activity against lorlatinib-resistant G1202R compound mutations

新型 ALK 抑制剂 NVL-655 对 lorlatinib 耐药的 G1202R 化合物突变具有有效的临床前活性

• 发表时间: 2022
• 作者: 水田隼斗;Ludovic Bigot;清水史郎;Anupong Tangpeerachaikul;Henry E. Pelish;Luc Friboulet
• 通讯作者: Luc Friboulet

C‐mannosylation regulates stabilization of RAMP1 protein and RAMP1‐mediated cell migration

C-甘露糖基化调节 RAMP1 蛋白的稳定性和 RAMP1 介导的细胞迁移

• DOI: 10.1111/febs.16592
• 发表时间: 2022
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: Mizuta Hayato;Takakusaki Ayane;Suzuki Takehiro;Otake Keisuke;Dohmae Naoshi;Simizu Siro
• 通讯作者: Simizu Siro