Development of a new in situ technique demonstrating methyaled cytosine by iso-thermal DNA amplification method

开发一种新的原位技术，通过等温 DNA 扩增方法展示甲基化胞嘧啶

• 批准号: 23659186
• 负责人: KITAZAWA Sohei
• 金额: $ 1.58万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23659186/
• 关键词: DNA; メチル化シトシン; 組織細胞化学; 遺伝子増幅; in situ hybridization; エピジェネティクス; メチル化; 組織化学; PCR; 減数分裂

By making a ICON probe which specifically bound to methylated cytosine on chromosomal DNA in a sequence specific manner, a strong chemical cross-linking was made by osmium reaction. By so-called PRINS method, a DNA elongation reaction was established using bounded ICON probe on the specific chromosome. Modified nucleotides were incorporated during this elongation stem and visualized by a conventional histochemical techniques. By this easy, methyalation status of specific chromosome or DNA sequence could be visualized. So far we gathered a lot of basic and fundamental data. We are now currently trying to visualize a single-copy gene during spermatogenesis in mouse testis, and updating our protocol for more stable and reliable one.

通过制备以序列特异性方式与染色体DNA上的甲基化胞嘧啶特异性结合的ICON探针，通过锇反应进行强化学交联。通过所谓的PRINS方法，使用特定染色体上的结合的ICON探针建立DNA延伸反应。在此延长茎期间掺入修饰的核苷酸，并通过常规组织化学技术可视化。通过这种方法，可以直观地显示特定染色体或DNA序列的甲基化状态。到目前为止，我们收集了大量的基础和基本数据。我们目前正试图在小鼠睾丸精子发生过程中观察单拷贝基因，并更新我们的方案，以获得更稳定和可靠的结果。

项目成果

The hedgehog signal induced modulation of bone morphogenetic protein signaling: an essential signaling relay for urinary tract morphogenesis.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0042245
• 发表时间: 2012
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Haraguchi R;Matsumaru D;Nakagata N;Miyagawa S;Suzuki K;Kitazawa S;Yamada G
• 通讯作者: Yamada G

Chemerin regulates β-cell function in mice.

• DOI: 10.1038/srep00123
• 发表时间: 2011
• 期刊: SCIENTIFIC REPORTS
• 影响因子: 4.6
• 作者: Takahashi, Michiko;Okimura, Yasuhiko;Iguchi, Genzo;Nishizawa, Hitoshi;Yamamoto, Masaaki;Suda, Kentaro;Kitazawa, Riko;Fujimoto, Wakako;Takahashi, Kenichi;Zolotaryov, Fyodor N.;Hong, Kyoung Su;Kiyonari, Hiroshi;Abe, Takaya;Kaji, Hidesuke;Kitazawa, Sohei;Kasuga, Masato;Chihara, Kazuo;Takahashi, Yutaka
• 通讯作者: Takahashi, Yutaka

Genetic lineage Tracing 法によるWnt/ β-カテニンシグナルに着目した子宮発生機序についての考察

遗传谱系追踪方法聚焦Wnt/β-catenin信号探讨子宫发育机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 原口竜摩;北澤理子;平田 務;北澤荘平
• 通讯作者: 北澤荘平

悪性リンパ腫におけるBob.1 遺伝子発現不活化・再活性化の分子病理学的検討

恶性淋巴瘤Bob.1基因表达失活/再激活的分子病理学研究

• 发表时间: 2013
• 作者: 渡部貴文;北澤理子;伊藤千尋;桑原奈都美;原口竜摩;北澤荘平
• 通讯作者: 北澤荘平

破骨細胞分化因子受容体RANK の新規変異体の解析

破骨细胞分化因子受体RANK新突变体分析

• 发表时间: 2013
• 作者: 北澤理子;向井智美;永井由紗;近藤武史;原口竜摩;北澤荘平
• 通讯作者: 北澤荘平