Dynamic conformational changes that regulate the energy-converting unit

调节能量转换单元的动态构象变化

• 批准号: 24657087
• 负责人: KOJIMA Seiji
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24657087/
• 关键词: 細菌べん毛; モーター; 膜タンパク質; 構造変化

The PomA/PomB complex, that functions as an energy-converting stator unit in the bacterial flagellar motor, becomes functional when installed into the appropriate place around the rotor. In the functional stator, it is believed that a conformational change in the periplasmic region of PomB is induced to anchor it and simultaneously to activate ion conduction activity of the stator. This study aims to detect such a conformational change using the fluorescent probe and the purified PomA/B complex reconstituted into the liposome. We are still on the way to establish the analyzing system, but we greatly improved the overproduction and purification procedure for the PomA/B complex, so that we could systematically screen conditions to reconstitute the functional stator complex to the liposome. We also succeeded in narrowing down the region where the conformational change occurs, by using the systematic disulfide bridge formation analysis.

POMA/POMB复合体在细菌鞭毛马达中作为能量转换定子单元发挥作用，当安装到转子周围的适当位置时就可以发挥作用。在功能定子中，人们认为Pomb周围质区的构象变化被诱导来锚定它，同时激活了定子的离子传导活性。本研究旨在利用重组到脂质体中的荧光探针和纯化的POMA/B复合体来检测这种构象变化。我们仍在建立分析系统，但我们大大改进了POMA/B复合体的过量生产和纯化程序，以便系统地筛选条件，将功能性定子复合体重组到脂质体中。我们还通过系统的二硫键形成分析，成功地缩小了发生构象变化的区域。

项目成果

Na^+駆動型べん毛モーター固定子タンパク質PomBの機能に重要なペリプラズム側構造変化の解析

Na^+驱动鞭毛运动定子蛋白PomB功能重要的周质结构变化分析

• 发表时间: 2013
• 作者: H. Osuka;Y. Shomura;H. Komori;N. Shibata;S. Nagao;Y. Higuchi;S. Hirota;吉良 新太郎 野田 佳苗 吉森 保 野田 健司;小嶋誠司
• 通讯作者: 小嶋誠司

Assembly-coupled activation mechanism of the Na^+-driven stator complex

Na^驱动定子复合体的装配耦合激活机制

• 发表时间: 2014
• 作者: T. Yagi;Y. Higuchi;Seiji Kojima
• 通讯作者: Seiji Kojima

細菌べん毛運動マシナリー : 機能的固定子複合体の集合と活性化

细菌鞭毛运动机制：功能性定子复合物的组装和激活

• 发表时间: 2012
• 作者: Mizuki Gohara1;Rei Abe-Yoshizumi;Shiori Kobayashi;Yohei Miyanoiri;Yoshikazu Hattori;Chojiro Kojima;Masatsune Kainosho;Michio Homma;小嶋誠司
• 通讯作者: 小嶋誠司

Contribution of Many Charged Residues at the Stator-Rotor Interface of the Na + -Driven Flagellar Motor to Torque Generation in Vibrio alginolyticus

• DOI: 10.1128/jb.01392-13
• 发表时间: 2014-04-01
• 期刊: JOURNAL OF BACTERIOLOGY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Takekawa, Norihiro;Kojima, Seiji;Homma, Michio
• 通讯作者: Homma, Michio

Na^+駆動型細菌べん毛モーター固定子の機能的集合と構造変化

Na^+驱动细菌鞭毛电机定子的功能组装和结构变化

• 发表时间: 2014
• 作者: 山口絵里花;小嶋誠司;本間道夫;小嶋誠司
• 通讯作者: 小嶋誠司