Development of methods to visualize small conformational change of proteins inside cells

开发可视化细胞内蛋白质微小构象变化的方法

• 批准号: 24657101
• 负责人: IMAMURA Hiromi
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24657101/
• 关键词: バイオイメージング; FRET; タンパク質動態; バイオセンサー; 抗体; アセチルCoA; 蛍光タンパク質; イメージング

Forster resonance energy transfer (FRET)-based biosensors that employ conformational changes of proteins are useful tools to obtain information inside living cells. However, it has been quite difficult to use proteins with small conformational changes for FRET biosensors. In this study, we used antibody to discriminate small conformational changes of proteins in order to overcome the above problem. We developed a FRET biosensor for an important metabolite, acetyl-CoA, by using an acetyl-CoA binding protein and an antibody against it.

基于Forster共振能量转移(FRET)的生物传感器利用蛋白质的构象变化，是获取活细胞内信息的有用工具。然而，将具有微小构象变化的蛋白质用于FRET生物传感器是相当困难的。在本研究中，我们使用抗体来区分蛋白质的微小构象变化，以克服上述问题。我们利用乙酰辅酶A结合蛋白及其抗体，研制了一种检测重要代谢物乙酰辅酶A的FRET生物传感器。

项目成果

Fluorescent ATP biosensor optimized for imaging of cells from non-vertebrate model organisms

针对非脊椎动物模型生物体细胞成像而优化的荧光 ATP 生物传感器

• 发表时间: 2012
• 作者: Imamura H;Tsuyama T;Uemura T;Kakizuka A
• 通讯作者: Kakizuka A

膵臓ランゲルハンス島におけるATPとCa^<2+>の同時イメージング

朗格汉斯胰岛中 ATP 和 Ca^<2+> 的同步成像

• 发表时间: 2014
• 作者: Fujikawa M;Imamura H;Nakamura J;Yoshida M;今村博臣
• 通讯作者: 今村博臣

ATPイメージングによる生細胞内ミトコンドリア機能の評価

通过 ATP 成像评估活细胞中的线粒体功能

• 发表时间: 2013
• 作者: 郷原瑞樹;竹川宣弘;小嶋誠司;本間道夫;今村博臣
• 通讯作者: 今村博臣

"ATP imaging in Xenopus laevis oocyte."In a book entitled "Sexual Reproduction in Animals and Plants"(Hitoshi Sawada, Naokazu Inoue, and Megumi Iwano)

“非洲爪蟾卵母细胞中的 ATP 成像。”在题为“动物和植物的有性生殖”的书中（Hitoshi Sawada、Naokazu Inoue 和 Megumi Iwano）

• 作者: Ijiri;T.W.;Kishikawa;J.;Imamura;H.;Iwao;Y.;Yokoyama;K. and Sato K.
• 通讯作者: K. and Sato K.

膵臓ランゲルハンス島におけるATPとCa2+の同時イメージング

朗格汉斯胰岛中 ATP 和 Ca2+ 的同步成像

• 作者: 田中喬;今村博臣
• 通讯作者: 今村博臣