Control of gene amplification-rate in animal cells, and its application

动物细胞基因扩增速率的控制及其应用

• 批准号: 24658290
• 负责人: SHIMIZU Noriaki
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24658290/
• 关键词: 遺伝子増幅; 組換え蛋白質生産; 染色体外遺伝因子; 細胞がん化; 細胞工学; 哺乳動物複製開始; 複製開始配列; 核マトリックス結合領域; IR/MAR; 蛋白質生産; ゲノム不安定性; 複製開始

We examined how the IR/MAR sequence, which promote replication initiation, accelerate the gene amplification that was stimulated by the Mtx treatment. Consequently, we uncovered that the IR/MAR sequence enable the initial extrachromosomal maintenance and multiplication of the introduced sequence, which allowed its integration to the multiple chromosomal loci that might be proximity to the chromosomal fragile sites. Thus, the target sequence might efficiently be amplified at the chromosomal context by the BFB cycle, after the Mtx treatments. Our study uncovered the gene amplification mechanism during cancer development. Furthermore, it provided the mechanistic base for the efficient production of protein pharmaceuticals.

我们研究了促进复制起始的IR/MAR序列如何加速MTX处理刺激的基因扩增。 因此，我们发现了IR/MAR序列可以使引入序列的初始植物外维持和繁殖，从而使其与可能与染色体脆弱位点接近的多个染色体基因座进行整合。 因此，MTX处理后的BFB循环可以在染色体环境下在染色体环境下有效扩增目标序列。 我们的研究发现了癌症发展过程中的基因扩增机制。 此外，它为有效生产蛋白质药物提供了机械基础。

项目成果

Recombinant protein production in CHO cells using the IR/MAR-amplification based technology

使用基于 IR/MAR 扩增的技术在 CHO 细胞中生产重组蛋白

• 发表时间: 2012
• 作者: Noriaki Shimizu;Yoshio Araki;Chiemi Noguchi and Tetsuro Hamafuji
• 通讯作者: Chiemi Noguchi and Tetsuro Hamafuji

IR/MAR遺伝子増幅法と、蛋白質生産への応用

IR/MAR基因扩增方法及其在蛋白质生产中的应用

• 发表时间: 2013
• 作者: Chiemi Noguchi;Yoshio Araki;Daisuke Miki;Nor iaki Shimizu;清水典明;田中俊介,満田祥平,清水典明;清水典明
• 通讯作者: 清水典明

ヒト染色体断片化による、自律複製する安定な染色体外遺伝因子の新生

由于人类染色体断裂产生稳定、自主复制的染色体外遗传元件

• 发表时间: 2013
• 作者: Chiemi Noguchi;Yoshio Araki;Daisuke Miki;Nor iaki Shimizu;清水典明;田中俊介,満田祥平,清水典明;清水典明;清水典明;元明優人，清水典明;田中俊介，満田祥平，清水典明;満田祥平，清水典明;坂丸 直人，浪花 修平，カポール リタ，宇谷 公一，清水 典明
• 通讯作者: 坂丸 直人，浪花 修平，カポール リタ，宇谷 公一，清水 典明

染色体外遺伝因子の細胞内安定性を支配する遺伝的背景と、染色体断片化による新規染色体外遺伝因子の形成

遗传背景控制染色体外遗传元件的细胞内稳定性以及通过染色体断裂形成新的染色体外遗传元件

• 作者: 浪花修平;カポール・リタ;宇谷公一;清水典明
• 通讯作者: 清水典明

哺乳動物細胞内で、遺伝子増幅により形成された反復配列からの発現を高めるヒトゲノム配列の、単離と解析

分离和分析人类基因组序列，增强哺乳动物细胞中基因扩增形成的重复序列的表达。

• 发表时间: 2013
• 作者: Chiemi Noguchi;Yoshio Araki;Daisuke Miki;Nor iaki Shimizu;清水典明;田中俊介,満田祥平,清水典明;清水典明;清水典明;元明優人，清水典明
• 通讯作者: 元明優人，清水典明