体成長と卵成熟の情報を感知し性成熟を促す魚類神経メカニズムの解明

①体成長にい伴ってGnRH1ニューロンの神経活動が活発になるメカニズム当初究課題で着目していたインスリン様成長因子1（igf1）に加え、igf2,igf3および、IGF受容体（igf1ra,igf1rb）の遺伝子発現が各成長段階に応じて変動するかをメダカ全脳サンプルを用いたqPCR法にて検証した。その結果、他の動物種と同様にigf1の発現が成長に応じて顕著に増加することを確認できた。また、成熟メスメダカの各臓器における上記IGF遺伝子とIGF受容体遺伝子の発現量をqPCR法にて定量し、先行研究で報告のあった肝臓での発現に加え、他の臓器でも発現していることがわかった。②性成熟期のGnRH1ニューロンに対するエストロジェンの作用メカニズム当初の計画を変更し、エストロジェン受容体をもち、エストロジェンによって神経活動が活発になるという報告のある細胞群に着目し、その細胞群をマイクロレーザーダイセクションによって採取し、RNA抽出したサンプルを用いてRNA-seq解析を実施した。現在、その結果を解析中である。また、メダカで発現が確認されている３種類のエストロジェン受容体のうち２種類がノックアウトされたメダカの作出を試み、現在データ解析中である。

①体成長にい伴ってGnRH1ニューロンの神経活動が活発になるメカニズム当初究課題で着目していたインスリン様成長因子1（igf1）に加え、igf2,igf3および、IGF受容体（igf1ra,igf1rb）の遺伝子発現が各成長段階に応じて変動するかをメダカ全脳サンプルを用いたqPCR法にて検証した。その結果、他の動物種と同様にigf1の発現が成長に応じて顕著に増加することを確認できた。また、成熟メスメダカの各臓器における上記IGF遺伝子とIGF受容体遺伝子の発現量をqPCR法にて定量し、先行研究で報告のあった肝臓での発現に加え、他の臓器でも発現していることがわかった。②性成熟期のGnRH1ニューロンに対するエストロジェンの作用メカニズム当初の計画を変更し、エストロジェン受容体をもち、エストロジェンによって神経活動が活発になるという報告のある細胞群に着目し、その細胞群をマイクロレーザーダイセクションによって採取し、RNA抽出したサンプルを用いてRNA-seq解析を実施した。現在、その結果を解析中である。また、メダカで発現が確認されている３種類のエストロジェン受容体のうち２種類がノックアウトされたメダカの作出を試み、現在データ解析中である。