糖尿病発症に性差をもたらす膵臓局所GnRHによるインスリン分泌調節機構

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本研究課題の目的は、膵臓局所に発現するGnRHと膵臓内分泌機能の関連を明らかにし、GnRH発現が性ホルモンに影響されることから、糖尿病発症率に見られる性差の発現機序を明らかにしようとするものである。実験動物として、GnRHを作らない突然変異マウスのhpgとGnRH下流で機能するアネキシンA5ノックアウトマウスを用い、それぞれの糖代謝と膵内分泌機構を解析する。これらのマウスはすでに有している。hpgは不妊なので、ヘテロで維持している。動物維持費が値上げされ、極めて高価になったことで計画の進捗に影響が出ている。膵臓はほぼ全てを占める外分泌腺と僅かな膵島からなり、膵島の遺伝子発現を調べるには膵島を分離する必要がある。初年度は、その方法の検討と習熟のためにかなりの時間を費やした。その他、免疫組織科学や遺伝子発現の測定など実験方法の確立を行なった。一方、イヌで糖尿病有病率に性差が報告されていることを踏まえ、開業獣医師の協力を得て症例を検討した。精巣を除去することで壮年時の有病率の低下することが明らかになった。精巣除去によって膵臓のGnRH発現が視床下部と同様に影響を受けると考えられるので、精巣除去の糖尿病有病率に及ぼす影響には興味が持たれる。またワイルドとアネキシンA5ノックアウトマウスを用いて糖負荷試験を試みている。方法を確立し例数を集めている段階だが、両者に差は認められなかった。hpgでも同様の試験を行いたいところだが、飼育に制約があるので進んでいない。膵島の組織像について、インスリンの免疫染色を行なっているがグルカゴンについてもやる必要がある。また膵臓におけるGnRH産生細胞を特定するためにインサイチュハイブリダイゼーションを始めているがまだ条件検討の段階である。膵臓局所においてGnRHがインスリンとアネキシンA5合成をβ細胞で促進しているのは確かだと思われる。