魚類体表粘膜創傷時における修復機構の解明

本研究は魚類の海面養殖等における疾病対策の指針としての「体表に生じた創傷を速やかに修復する能力」に着目し、魚類の体表に物理的刺激を与えた際の粘液中のタンパク成分の経時的変化を検出・解析し、魚類の体表粘膜修復機構に関する知見を得ると共に、それらの修復に重要となる成分を特定して（養殖現場等における）体表粘膜コンディションの評価指標として活用することを目指す。研究期間の2年目となる2022年度は初年度に引き続き主要な養殖魚種であるブリを対象として、体表に刺激を与えた後に粘液中に現れるタンパク成分を網羅的解析手法によりピックアップし、その成分を質量分析により同定した。2022年度は特に創傷刺激から比較的短い時間においての粘液成分変化を注視し、刺激後に新規に粘液中に現れたタンパクスポットを二次元電気泳動後のゲルから抽出、質量分析により同定した。その結果、組織障害により生じたと思われるタンパク成分や、細胞内に多く含まれるタンパク成分等がブリの転写産物データベースと照合し同定された。また得られた結果からサンプリングタイムテーブルを再設計し、且つ個体ごとのばらつきを極力抑える意図で、あらかじめ海面生簀から陸上水槽に移し2週間以上経過した試験魚で新たに創傷刺激試験を行った。試験サンプルとしては体表粘液の他、血清サンプル、遺伝子発現解析用に表皮サンプルと肝臓や頭腎のサンプルも取得した。体表で変動したタンパク成分がどの組織に由来するのかを統合オミクス的な手法で解析することも予定している。

本研究は魚類の海面養殖等における疾病対策の指針としての「体表に生じた創傷を速やかに修復する能力」に着目し、魚類の体表に物理的刺激を与えた際の粘液中のタンパク成分の経時的変化を検出・解析し、魚類の体表粘膜修復機構に関する知見を得ると共に、それらの修復に重要となる成分を特定して（養殖現場等における）体表粘膜コンディションの評価指標として活用することを目指す。研究期間の2年目となる2022年度は初年度に引き続き主要な養殖魚種であるブリを対象として、体表に刺激を与えた後に粘液中に現れるタンパク成分を網羅的解析手法によりピックアップし、その成分を質量分析により同定した。2022年度は特に創傷刺激から比較的短い時間においての粘液成分変化を注視し、刺激後に新規に粘液中に現れたタンパクスポットを二次元電気泳動後のゲルから抽出、質量分析により同定した。その結果、組織障害により生じたと思われるタンパク成分や、細胞内に多く含まれるタンパク成分等がブリの転写産物データベースと照合し同定された。また得られた結果からサンプリングタイムテーブルを再設計し、且つ個体ごとのばらつきを極力抑える意図で、あらかじめ海面生簀から陸上水槽に移し2週間以上経過した試験魚で新たに創傷刺激試験を行った。試験サンプルとしては体表粘液の他、血清サンプル、遺伝子発現解析用に表皮サンプルと肝臓や頭腎のサンプルも取得した。体表で変動したタンパク成分がどの組織に由来するのかを統合オミクス的な手法で解析することも予定している。