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Analysis of a novel mechanism of nuclear localization for arthropod-borne Orthobunyavirus nucleoprotein

节肢动物传播的正布尼亚病毒核蛋白核定位新机制的分析

基本信息

批准号：
21K14981
负责人：
河原円香
金额：
$ 2.08万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

節足動物媒介性の人獣共通感染症ウイルスであるオルソブニヤウイルスの一種オロプーシュウイルス(OROV) は中南米でデング熱に次いで頻発する新興感染症であるが、病原性発現機構や作用機序に関する研究は十分ではない。一方申請者はOROVが既存の感染機構では報告されていない「核蛋白質(N)が感染細胞の核に集まる」様子を観察した。感染細胞で産生される主要な蛋白質であり、ウイルス感染に必要不可欠であるNの細胞内挙動を明らかにすることは、未だ病原性メカニズムが明らかではないOROVの新たな感染機構の解明につながると考えた。そこで本研究では「OROVのNが感染細胞の核に局在する」という新たな現象の解明を目的とした。本年度は感染細胞を用いて経時的なNの局在の変動について詳細な解析を行った。感染細胞の核・細胞質を分画し、それぞれの画分におけるNの存在量を経時的に測定した結果、各種感染細胞においてNの存在量および集積時間に差があることが明らかとなった。またOROV以外のオルソブニヤウイルスとしてOROVと同じ血清群のサシュペリウイルス、異なる血清群のブニヤムウェラウイルスを用いて免疫染色により細胞内のNの局在を観察したところ、これらのウイルスにおいてもNが核に局在することを確認した。ただ一方でブニヤムウェラウイルスの核小体シグナル予測のスコアはOROVと比較して低く、また感染時にNが核に局在する時間が異なる結果を得た。現在この差異についての解析を行っている。

Arthropod-borne human-borne infectious diseases (ARVs) are highly regarded as emerging infectious diseases, pathogenic mechanisms, and mechanisms of action. One applicant investigated the existence of an OROV infection agency and reported "nuclear protein (N) in infected cells." Infected cells produce major proteins that are essential for infection. Intracellular activity of the infected cells is not pathogenic. This study aims to clarify the new phenomenon of OROV infection in the nucleus. This year, the infection of cells in the use of time, the situation in the movement of detailed analysis The results of the measurement of the amount of N present in the nucleus and cytoplasm of infected cells and the accumulation time of N present in various infected cells are as follows: In addition, OROV and the same serogroup were detected by immunostaining, and the same serogroup and the different serogroup were detected by immunostaining. The results of the comparison between the predicted time of infection and the predicted time of nucleosomes were different. Now the difference is analyzed.