遅筋速筋型アセチルコリン受容体の生理的機能の解析

慢肌、快肌乙酰胆碱受体的生理功能分析

• 批准号: 21K15348
• 负责人: 山下 愛美
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15348/
• 关键词: 遅筋と速筋; アセチルコリン受容体; 筋弛緩剤; 速筋と遅筋; 骨格筋

ゼブラフィッシュは受精後24時間までは遅筋を、48時間以降は速筋と遅筋を用いて泳ぐ。そのため、受精後24時間までの個体と48時間以降の個体に薬剤を投与し、効果に違いがあるか調べた。受精後24時間の個体では効果が弱く、48時間以降の個体では効果が強い、すなわち、遅筋への効果は弱く、速筋に選択的に効くと考えられる筋弛緩剤を複数種同定している。そのような薬剤の中でも特にPancuroniumに着目して解析を行った。ゼブラフィッシュの遅筋と速筋からホールセル記録を行い、速筋の方がPancuroniumが効きやすいことを確認した。ゼブラフィッシュにおいては速筋と遅筋でアセチルコリン受容体のサブユニット構成が異なることが知られており、上記効果の違いはアセチルコリン受容体のサブユニット構成の違いによるものではないかと考え、アフリカツメガエルの卵細胞に速筋型アセチルコリン受容体と遅筋型アセチルコリン受容体のサブユニットを発現させ、アセチルコリン投与によるPancuroniumの阻害効果を測定したところ、やはり速筋型アセチルコリン受容体においてPancuroniumの阻害効果が強いことがわかった。速筋と遅筋におけるアセチルコリン受容体のサブユニット構成の違いはゼブラフィッシュにおいては報告されているが、マウスやヒトなどにおいては確認されていない。ヒトアセチルコリン受容体においても同様の効果があるか確認するため、HEK293T細胞にヒトアセチルコリン受容体を発現させ同様の実験を行ったところ、ヒトアセチルコリン受容体においても速筋型においてPancuroniumの阻害効果が強いことが確認された。

斑马鱼在施肥后长达24小时，使用缓慢的肌肉，并在48小时后使用快速和缓慢的肌肉游泳。因此，该药物是在受精后长达24小时和48小时后对个体进行的，以确定有效性是否存在差异。受精后24小时的个体很弱，48小时后的个体强劲，这意味着他们在慢肌肌肉上弱，并且认为多种肌肉松弛剂在快速肌肉肌肉上有选择性地有效。在此类药物中，进行了分析，特别注意胰腺。使用斑马鱼中的慢速肌肉进行全细胞记录，并确认胰腺在快速肌肉中更有效。众所周知，乙酰胆碱受体的亚基组成在斑马鱼中的快速肌肉肌肉之间有所不同，上述作用可能是由于乙酰胆碱受体的亚基组成的差异所致。当爪蟾卵细胞表达快速肌肉乙酰胆碱受体和缓慢的肌肉乙酰胆碱受体的亚基时，通过测量乙酰胆碱给药的抑制作用来测量胰腺的抑制作用，并且发现胰腺的抑制作用在快速肌肉乙酰基乙酰胆碱受体中的抑制作用很强。在斑马鱼中已经报道了乙酰胆碱受体在快速和缓慢肌肉之间的亚基组成的差异，但在小鼠，人类等中尚未确认，以确认人类乙酰胆碱受体是否具有相同的作用，我们在HEK293T细胞中表达了类型的人类乙酰胆碱受体，并在HEK293T细胞中表达了相似的实验在人乙酰胆碱受体中很强。