NSAIDsによるABCC3とROSを介した家族性大腸腺腫症の発癌抑制機構の解明

NSAIDs与ABCC3和ROS介导的家族性腺瘤性息肉病的致癌抑制机制的阐明

• 批准号: 21K15477
• 负责人: 小林 実
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15477/
• 关键词: ABCC3; Wntシグナル; 家族性大腸腺腫症; FAP; 活性酸素種; ROS; MRP3; NSAIDs

既存の論文より活性酸素種(ROS)がABCC3の基質である可能性が高いと考え、実験を施行していたが、我々の実験結果にてABCC3はROSを排出するのではなく、ROSを検出するために用いていた試薬であるdichlorodihydrofluorescin diacetateを排出しているということが判明した。これによって実験結果を大きく変更する必要性が生じた。そのため令和４年度は当初の計画を変更し以下の研究を行った。以前、大腸癌においてABCC3の発現がWntシグナルによって抑制されていることを示したが、令和４年度は、まずこの事象が家族性大腸腺腫症(FAP)における腺腫の段階でも生じていることを確かめるための実験を行った。これまで１例の患者由来の腺腫において結果を示していたが、新たに４例の患者の腺腫においてもABCC3の発現低下を確認した。さらに公開されているデータベースの解析においてもFAPモデルマウスの腺腫由来のオルガノイドでABCC3の発現低下が確認された。次にROSに代わるABCC3の基質候補として、我々が過去に使用してきたデオキシコール酸(DCA)に着目し、DCAが大腸癌発癌に関わるMAPKシグナルに与える影響を解明する実験を行った。ABCC3を過剰発現させた大腸癌細胞株（SW620, HT-29）にDCAを加えた結果、Controlに比べてMAPKシグナルの活性化を示すERKのリン酸化がタンパクレベルで抑制されていることが明らかとなった。その結果からABCC3の発現上昇によってDCAによるMAPKシグナルの活性化が抑制されることが示唆された。過去の研究でSW620においてABCC3の発現により細胞内DCA濃度が変化することが示唆されているため、ABCC3が細胞内のDCA濃度変化に影響を与え、その結果MAPKシグナルの活性化にも影響を与えていると考えられた。

The results show that the probability of ROS formation in ABCC3 matrix is high, and the probability of ROS formation in ABCC3 matrix is high. This is the result of a great deal of effort. The following research was carried out in the first four years of the year. In the past, the development of ABCC3 in colorectal cancer was inhibited by Wnt, and in the fourth year, it was shown that familial colorectal adenomas (FAP) occurred in stages of adenomas. The results showed that there was a decrease in ABCC3 in 4 patients with adenomas. The analysis of ABCC3 in the open media confirmed that ABCC3 had a low occurrence rate. In addition, ROS generation of ABCC3 matrix candidates has been used in the past to investigate the effects of MAPK on colorectal cancer development. ABCC3 was detected in colorectal cancer cell lines (SW620, HT-29). The results of DCA addition and Control showed that ERK activation was inhibited by DCA. As a result, ABCC3 production was increased and MAPK activation was inhibited. Previous studies have shown that the expression of ABCC3 in SW620 cells is affected by changes in intracellular DCA concentration, and ABCC3 cells are affected by changes in intracellular DCA concentration. The results show that MAPK activation is affected by changes in intracellular DCA concentration.