新規モデルマウスによる神経発達症のエピゲノム変化の解明

使用新的小鼠模型阐明神经发育障碍的表观基因组变化

基本信息

批准号：
21K15888
负责人：
久松大介
金额：
$ 3万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者は、発生期の神経幹・前駆細胞(NSPC)のニューロンサブタイプ分化能に重要な役割を持つ転写因子の一つとしてPHF21Bを見出している。この因子の類似遺伝子であるPHF21Aは、自閉スペクトラム症(ASD)などの神経発達症の責任因子のひとつとして知られているが、神経発達障害におけるPHF21Bの役割は不明である。また、この因子はその構造からエピジェネティック修飾に関与することが予想される。そこで、本研究では従来法よりも簡便かつ迅速にゲノム編集が可能な遺伝子改変技術により、Phf21bの遺伝子改変マウスを作製し、エピゲノム制御の観点から発症機構に関与するか否かを明らかにする。これまでニューロンサブタイプ分化能の変化に影響を与える因子としてPhf21bの他に、2つのエピジェネティクス関連因子を見出している。しかしながら、これら3つの転写因子の結合部位や相互関係は不明である。そこで、本年度はこれらの遺伝子の結合部位を明らかにするため、3つの遺伝子の下流にクロマチン免疫沈降シーケンス(Chip-seq)に有効なTy1タグをノックインしたES細胞の樹立を試みた。また、前年度に実施した3因子の大脳皮質に特異的な過剰発現および機能阻害実験を進め、さらに中脳や線条体など他の中枢神経系領域における機能解析へと拡大することで、これらの因子が中枢神経系領域に共通して作用していることを明らかにしつつある。一方で、機能阻害では十分な表現型を得られない可能性があることから、ノックアウトマウスの作製を試みた。

申请人发现PHF21B是在神经元亚型分化潜力（NSPC）中起重要作用的转录因子之一。 PHF21a是该因素的类似基因，被称为神经发育障碍（例如自闭症频谱疾病（ASD））的责任因素之一，但是PHF21B在神经发育障碍中的作用尚不清楚。还可以预期，由于其结构，该因素参与了表观遗传修饰。因此，在这项研究中，我们将使用遗传修饰技术来制备PHF21B的遗传修饰小鼠，这些技术允许基因组比常规方法更容易和快速地编辑，并阐明它们是否从表观镜头组调节的角度参与了发作机制。除了PHF21B外，还发现了两个与表观遗传相关的因素是影响神经元亚型分化能力变化的因素。但是，这三个转录因子的结合位点和相互作用尚不清楚。因此，在今年，为了阐明这些基因的结合位点，我们试图建立在TY1 TAG中敲打的ES细胞，对三个基因下游的染色质免疫沉淀序列（CHIP-SEQ）有效。此外，通过进行上一年进行的实验，并抑制了特定于大脑皮质的三个因素，并将其扩展到其他中枢神经系统区域的功能分析，例如中脑和纹状体，例如中间脑和纹状体，即这些因素对中枢神经系统区域具有共同的影响。另一方面，由于对功能的抑制可能不会导致足够的表型，因此我们试图创建敲除小鼠。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Precision diagnosis of neurodegenerative diseases based on salivary microbiome profiles

基于唾液微生物组谱的神经退行性疾病精准诊断

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Naraoka Yuna;Mabuchi Yo;Yoneyama Yosuke;Suto Eriko Grace;Hisamatsu Daisuke;Ikeda Mami;Ito Risa;Nakamura Tetsuya;Takebe Takanori;Akazawa Chihiro;Daisuke Hisamatsu
通讯作者：
Daisuke Hisamatsu

新型コロナウイルス中和抗体又はその機能的断片

新型冠状病毒中和抗体或其功能片段